0引言

    自超声乳化治疗白内障以来，如何降低超声乳化过程中角膜内皮的损伤，一直是眼科医生探讨和研究的课题。随着手术仪器、手术方法的改进和粘弹剂的出现，其手术并发症越来越少；但必须承认，由于各种因素的影响，仍然存在发生各种并发症的可能。最常见的是由角膜内皮细胞损伤引起的术后角膜水肿、混浊，甚至是大泡性角膜炎，严重影响手术效果。小牛血去蛋白提取物（DECB）是从幼牛静脉血、胎肝、胸腺中提取，经纯化、超滤等工艺制成的去蛋白小分子制剂，含有有机离子及小分子肽（分子量小于5 000D）、氨基酸、核苷酸、低聚糖、脂类等小分子有机物。DECB能促进葡萄糖向组织内转运, 促进细胞对葡萄糖和氧的摄入及利用，促进细胞代谢，改善细胞的能量代谢状态，对由于缺血造成的细胞能量代谢降低具有拮抗作用，并具有促进内皮细胞和其他类型细胞游走和增殖的作用。本实验以含有一定浓度DECB的BSS作为超声乳化白内障吸除术的术中冲洗剂和术后留置剂，术后观察内皮细胞损伤的修复和再生，探讨DECB在超声乳化术白内障吸除术中应用的可能性。为解决超声乳化白内障吸除术后角膜内皮细胞的修复提供新的方法，为寻求更好的眼内灌注液提供理论依据，也为DECB新的临床应用提供必要的理论基础和实验依据。

    1材料和方法

    1.1材料 纯种日本大耳白兔24只，锦州医学院实验动物中心提供；雌雄不限，1.5～2.0kg。小牛血清去蛋白注射液，锦州奥鸿药业有限责任公司提供；爱维（医用透明质酸钠凝胶），山东博士伦福瑞达制药公司提供；BSS必施（平衡盐灌注液），日本参天制药株式会社提供；妥布霉素地塞米松滴眼液，S.A.ALCON-COUVREUR N.V 提供；茜素红，天津市大茂化学试剂厂提供；锥蓝（曲利本蓝），天津市光复精细化工研究所；白内障超声乳化系统（sovereign），美国；接触型角膜内皮反射显微照相系统，EM-1020，日本；超薄切片机（LKB-Ⅴ），瑞典；透射电子显微镜（JEM-120EX），日本；显微镜（Olympus），日本。

    1.2方法 日本大耳白兔24只右眼设定为实验组，左眼为对照组。使用美国sovereign超声乳化系统，常规显微手术器械，设置恒定参数： 乳化功率20％，负压33.25kPa，（1mmHg=0.133kPa），瓶高170mm，乳化时间100s。手术前，所有日本大耳白兔均用复方托吡卡胺滴眼液散瞳，100g/L水合氯醛腹腔注射麻醉，用盐酸奥布卡因点双眼表面麻醉角膜。实验组灌注液为含100mg/L DECB的BSS,对照组灌注液为BSS。用兔头固定器固定好，庆大霉素－生理盐水冲洗术眼，于上方12点位角巩膜缘穿刺入前房，注入黏弹剂；环行撕囊；扩大切口至3mm超声乳化头置于中央区乳化吸出晶状体核及皮质；手术结束后1min自角膜缘处吸出0.1mL房水，随后实验组将0.1mL含有100mg/L DECB液的BSS注入前房；对照组将0.1mL BSS注入前房。记录抽吸力，灌注量等指标。术后妥布霉素地塞米松滴眼液点双眼，2h 1次。术后裂隙灯观察角膜。应用日本Topcon公司生产的EM-1020型接触型角膜内皮反射显微照相系统对角膜中央区0.25mm×0.37mm范围进行照相，行角膜内皮细胞形态学定量测定；然后进行统计分析，观察时间为术前和术后即刻，术后6，12，24，72， 168h。测量指标为平均细胞面积(average size)，细胞变异度(cell cytometaplasia),细胞密度（ cell density）。分别于术后6，24，72h取实验组和对照组带巩膜环的兔角膜片制作透射电子显微镜标本，观察比较角膜内皮超微结构。

    2结果

    2.1大体观察 实验组和对照组无明显差异：所有实验眼于术后6h后出现少量房水闪辉，术后24～48h最严重，以后逐渐减轻。3～5d个别出现角膜后KP，几乎所有动物均发生角膜轻度混浊和切口部位局部水肿。

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