杨静 谭浅 胡梅
湖南省中南大学湘雅医院眼科410008
目的:研究2型重组腺相关病毒(rAAV)载体介导的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染兔晶状体上皮细胞(LEC)中的浓度依赖性和时间依赖性,为rAAV2携带治疗基因防治PCO提供理论依据。
方法:将36只白兔随机分成4组,晶状体超声乳化吸取术后,前房内分别注射不同浓度的rAAV2-EGFP悬液0.1ml,术后抗炎及散瞳。术后1周、2周、4周分离晶状体囊膜,荧光显微镜下观察EGFP的转染情况。分离虹膜及角膜行HE染色。采用spss11.0软件包。
结果:在晶状体前囊撕囊部位及赤道部有绿色荧光蛋白表达的细胞较多,染色较深,后囊中央部阳性细胞较少染色浅,表达率随着时间延长增高,第4周时可高达95%。各组间角膜及虹膜未见明显差异。
结论:rAAV2可介导报告基因稳定转染晶状体上皮细胞,转染效率较高,并且具有浓度依赖性和时间依赖性;rAAV2载体对周围组织毒性较小,是携带目的基因转染晶状体上皮细胞的良好载体。
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