作   者： 禹海    陈蕾    徐旭    姜晶  

　　关键词：糖尿病视网膜病变/治疗;基因疗法;血管内皮生长因子A;核苷酸类;糖尿病;实验性;Diabetic retinopathy/therapy;Gene therapy;Vascular endothelial growth factors;Nucleotides;Diabetes mellitus, experimental

　　摘   要：目的 以重组腺相关病毒载体(rAAV)介导色素上皮衍生因子(PEDF)转染糖尿病大鼠视网膜.观察其表达及其对血管内皮生长因子(VEGF)和视网膜微血管的影响.

　　方法 雄性Wister大鼠链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型.随机分为1(DM1)、3(DM3)、6(DM6)个月组.右眼玻璃体注射rAAV2-CMV-hPEDF作为治疗组,左眼注射rAAV2-CMV-GFP作为自身对照眼.正常大鼠右眼假注射,左眼不注射.应用半定量逆转录聚合酶链反应和Western blot测定VEGF和PEDF的mRNA和蛋白的表达情况,应用视网膜血管铺片观察视网膜微血管的变化.

　　结果 注射后大鼠治疗眼视网膜hPEDF mRNA表达不断增强,持续到6个月,达到顶峰.PEDF蛋白表达亦不断增加,与同时间点对照眼相比差异有统计学意义(t=4.292,10.721,16.692;P<0.01).治疗组各时间点视网膜VEGF mRNA及蛋白表达量相互间无统计学意义(t=1.621,0.698,0.758;P>0.05).均显著高于正常对照组(t=5.171,6.857,7.542;P<0.05).但与同时间点自身对照眼相比表达显著降低(t=2.343,3.263,4.455;P<0.01).糖尿病大鼠治疗眼与自身对照眼视网膜微血管形态在1个月时与正常对照组视网膜相比无显著差异,但3个月与6个月时治疗眼与自身对照眼相比视网膜毛细血管损伤改变明显减轻.

　　结论 rAAV2-CMV-hPEDF玻璃体注射可增加糖尿病大鼠视网膜PEDFmRNA和蛋白水平表达,改善其早期视网膜微血管的损害,并抑制VEGF的表达,其调节在mRNA水平.

　　来源：中华眼底病杂志