摘要 目的 观察神经生长因子p(p.NGF)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增生的影响,探讨翼状胬 肉的发病机制。方法对翼状胬肉组织标本行组织块培养。待细胞生长汇合至80% 后以0.25% 胰蛋白酶+ 0.02%EDTA 1:1混合消化细胞,取3~5代细胞用于实验。通过细胞中波形蛋白、角蛋白及n平滑肌肌动蛋白的表达鉴定培养的细胞,免疫荧光法检测HPF中 —NGF受体trkA、p75的表达,MTT法检测不同质量浓度 —NGF对HPF的作用,Westernblot及RT—PCR法半定量检测细胞核抗原(PCNA)来评估HPF的增生。结果 波形蛋白、0l平滑肌肌动蛋白、trkA和p75在HPF中呈阳性表达;MTT结果显示,在B—NGF作用12、24、48、72和96 h后,48 h为p—NGF促增生的高峰期;在不同质量浓度B—NGF(5~50 ng/mL)作用下,HPF中PCNA蛋白及mRNA的表达与0和1 ng/mL p—NGF作用组之间比较差异均有统计学意义(F。⋯ =24.980,P=0.000;F R A=64.490,P=0.000)。 结论 NGF可能通过结合两受体trkA、p75促进了HPF的增生。
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