| 糖尿病视网膜病变患者血清胰岛素样生长因子含量测定 |
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| http://www.cnophol.com 2010-8-25 11:17:14 中华眼科在线 |
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【关键词】 糖尿病视网膜病 胰岛素样生长因子I 表皮生长因子-尿抑胃素 放射免疫测定
中国图书资料分类法分类号 R771.3 R446
近年来发现生长因子参与视网膜疾病的发生及发展，其中胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1，IGF-1)、表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)可能是与增殖性视网膜疾病密切有关的重要因子[1，2]。我们用放射免疫法测定糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)患者血清IGF-1及EGF含量，并与正常人进行对比，以探讨两种生长因子在糖尿病视网膜病变病理过程中的作用。
1 对象和方法
1.1 对象 ①正常对照组：本院正常体检者20例，男9例、女11例，年龄40～60岁，排除高血压、糖尿病等全身性疾病，通过询问病史及眼部检查排除眼部疾患。②DR组：内科确诊的糖尿病患者，按照我国眼底病学组1984年制定的“糖尿病视网膜病变分期标准”，诊断为单纯性糖尿病视网膜病变(background diabetic retinopathy，BDR)者20例，男12例，女8例，年龄53～72岁，病程6～15年;增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy，PDR)者20例，男11例，女9例，年龄55～76岁，病程7～21年，其中并发新生血管性青光眼者2例，玻璃体积血者5例。除并发新生血管性青光眼及玻璃体积血的7例患者，其余DR组患者均根据散瞳眼底检查及眼底荧光血管造影检查确诊和分型。
1.2 方法 ①标本及药盒：采集晨起空腹血2ml，离心后保存于-20℃冰箱中待测。IGF-1放射免疫药盒由美国INCSTAR公司提供;EGF放射免疫药盒由北京北方生物技术研究所提供。②血清中IGF-1的提取及检测：将250μl质控及待测标本与1ml盐酸混合，用10ml注射器分别抽取异丙醇、甲醇和乙酸对Octadecasilyl-silica 柱进行预处理，将前述样本过柱，用乙酸冲洗2次，用色谱纯的甲醇洗脱，收集洗脱液，置37℃水浴中，用压缩氮气吹干，加入500μl零标准品复融，取50μl作放射免疫检测。将标准品、质控及待测标本各50μl及200μl抗血清加入试管中，2～8℃孵育2小时，各加200μl 125 I标记的IGF-1，2～8℃孵育20小时，各加混匀后的IGF-1沉淀复合物500μl，2～8℃孵育2小时，20～25℃下以3 000r/min离心20分钟，去上清，将沉淀物用GC-911型自动γ计数器测定并显示标准曲线，给出样本中的IGF-1含量。③EGF检测：按放射免疫药盒说明书进行操作。
1.3 统计学处理 用SAS 611 for Windows软件进行方差分析，Newman-Kewls(Q)检验及直线相关分析。
2 结果
BDR组及PDR组血清中IGF-1及EGF含量明显高于对照组，且PDR组中IGF-1及EGF含量明显高于BDR组(附表)。
附表 PDR组、BDR组、正常对照组血清IGF-1、EGF含量比较()
例数IGF-1(nmol/L)EGF(ng/ml)
对照组2019.098±7.5760.738±0.128
BDR组2040.577±8.020**1.179±0.075*
PDR组2068.752±13.258**△△1.619±0.228**△
F值 24.7445.71
P值 <0.01<0.01
注：与对照组比较*P<0.05 **P<0.01 与BDR组比较△ P<0.05，△△P<0.01 对IGF-1及EGF的测定值进行相关分析，显示两者血清含量呈明显正相关(r=0.8504，P=0.01)。
3 讨论
本研究结果表明随DR的加重，血清中IGF-1、EGF含量增高，BDR、PDR及对照组中IGF-1、EGF血清含量的两两比较均有显著性差异。Mayer[3]的研究表明PDR患者玻璃体IGF-1明显增高，存在虹膜红变者IGF-1水平明显高于其他患者。Patel[1]对正常视网膜、PDR视网膜及PDR视网膜前膜用免疫组织化学的方法进行EGF测定，结果显示非糖尿病眼神经视网膜层为弱染色，PDR视网膜及视网膜前膜为强染色，表明在DR中血液、玻璃体及视网膜IGF-1、EGF含量增高。视网膜血管缺血、缺氧，可使血视网膜屏障破坏，IGF可使视网膜血流增加[4]，这些因素都使血液中的某些物质易于透过血视网膜屏障分布到视网膜间质中去。我们在研究中发现病情较重的PDR，例如并发新生血管性青光眼或玻璃体积血的PDR患者，其血清中的IGF-1、EGF含量明显较其他患者高，除视网膜自身分泌因素外，随DR病程的延长，血视网膜屏障破坏程度不断加重，使血清中IGF-1、EGF较易直接渗入玻璃体内，也使单核细胞更易侵入眼内，于局部释放IGF-1、EGF，可能也是眼内IGF-1、EGF增高的原因之一。通过直线相关分析显示血清IGF-1、EGF含量呈显著正相关，说明二者具有协同作用。
本课题受山东省卫生厅科研基金资助，基金号97058
作者单位：250021 济南，山东省立医院眼科(赵博军、毛瑞和、申家泉、陈桂云)，核医学科(刘占锋) |
| （来源：互联网）（责编：xhhdm） |
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