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2结果
2.1细胞形态学观察 实验中观察到细胞分布适中，DNA较均匀，清楚地反映了细胞的损伤情况。各处理组细胞呈不同程度的彗星图像，头尾分明(图1)。未处理组LECs表1 各处理组LECs尾长，尾部DNA百分比，尾力矩比较
呈圆形基本无拖尾、保持较完整的拟核状态(图1A);对照组LECs从胞核中溢出的单链DNA片段最多，表现为尾部长度最长、荧光强度最强(图1B);相同浓度时，PC组、TAU组和VC组LECs尾长逐渐增加，尾部荧光强度逐渐增大(图1CE)。
2.2各处理组尾长、尾部DNA百分比和尾力矩比较 各PC组尾长与对照组和未处理组比较，差异均有统计学意义(P<0.01);各抗氧化剂组间比较，差异均具有统计学意义(P<0.01);0.1mg/mL TAU组尾长与0.05mg/mL TAU组比较，差异无统计学意义。各PC组尾部DNA百分比与对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.01);与未处理组比较，差异均无统计学意义;0.2mg/mL VC组的尾部DNA百分比与对照组比较,差异无统计学意义。各抗氧化剂组间尾长、尾部DNA百分比、尾力矩比较，差异均具有统计学意义(P<0.01);相同浓度时，各检测指标从PC到VC逐渐增加，且在一定浓度范围内，均有随其浓度的增加，尾长、尾部DNA百分比、尾力矩逐渐减小。各PC组尾力矩与对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.01);与未处理组比较，差异均无统计学意义(表1)。
3讨论
UVB是紫外线中最具生物学意义的一种，Boettner和Wolter的研究表明晶状体可吸收绝大部分到达眼部的UVB。本实验选择UVB段紫外灯，有针对性的复制LECs的氧化损伤模型，进一步证实了UVB对LECs的氧化损伤作用。
原花青素是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂，广泛分布在葡萄、银杏等多种植物中。其抗氧化能力是VE的50倍，VC的20倍[6]。在抗肿瘤[7]、抗衰老[8]及对其它药物的协同作用[9]等方面有很好的效果。本实验结果提示各PC组的尾部DNA百分比、尾力矩与未处理组比较，差异均无统计学意义(P<0.01)，表明其对人LECs具有较强的保护作用。以往已有实验证实PC在白内障方面的应用，Durukan等[10]在用亚硒酸钠致大鼠白内障模型的研究中，发现PC能有效的抑制白内障的发生。Jourdain等[11]用可可豆提取物PC作用于糖尿病性白内障的大鼠，亦发现其具有良好的抗糖尿病鼠白内障发生的效果。本实验将PC应用于UVB致损伤的人LECs上，明确了在体外培养条件下PC对LECs的保护作用，以及对白内障的预防作用。在以往的研究中，牛磺酸和VC对LECs氧化损伤的保护作用均已得到明确证实[12,13]，我们将PC对人LECs的保护作用与牛磺酸和VC作对比，三者的差异具有统计学意义，表明其抗氧化作用强度不同。从数值上看，各PC组的细胞损伤情况均明显小于同剂量组的另两种抗氧化剂，明确证实了PC对于LECs的保护作用明显强于牛磺酸和VC。并且实验发现PC的抗氧化作用呈现浓度依赖的量效关系，即在一定范围内随浓度的增加，PC对于LECs的保护作用逐渐增强。SCGE实验成功与否的最关键步骤就在于铺胶，有时轻柔操作尚无法避免脱胶，针对这一问题，本实验在铺胶方法上作了一些改良，与以往不同，本实验增加了经多聚赖氨酸预处理和正常熔点琼脂糖凝胶铺胶过火两个步骤，事实证明该改良方法确实减少了脱胶问题的出现，又未对实验结果产生明显影响，明显提高了实验的成功率，希望对完善和改进该实验步骤会有一定帮助作用。
本研究结果显示PC对于紫外线导致的晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用明显强于牛磺酸和VC。目前国内外已经逐步将PC抗炎、抗氧化、调节免疫等相关作用应用于眼科的研究中，并初步证实其在葡萄膜炎[14]、保护角膜基质细胞[15]和视网膜神经血管疾病[16,17]等方面的应用。已有临床证实PC眼用剂型对于干眼症的确切治疗作用[18]，这也让我们看到了PC的巨大研究价值和发展潜力。但对于PC如何进入眼内发挥抗氧化作用，哪些有效成分起主要作用及有效质量浓度等问题还有待进一步探讨。希望通过更深入的研究，在不久的将来能为白内障的临床治疗提供一种有效的药物。
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11 Jourdain C, Tenca G, Deguercy A, et al. In vitro effects of polyphenols vom cocoa and betasitosterol on the growth of human prostate cancer and normal cells. Eur J Cancer Prev 2006;15(4):353361
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