3 讨论

　　组织学上对刀切口和CO2激光切口的愈合比较已有研究文献报道，其结果表明CO2激光对其周围组织有一定的热损伤[2]，CO2激光手术创口收缩晚，上皮形成缓慢[1，3]。我们的研究结果与其基本一致。

　　本研究的成纤维细胞计数结果表明，对照组与激光组在创伤愈合过程中成纤维细胞的数量动态变化经历为：增殖期、高峰期和消减期，具有明显的时相性特点，而两组之间不同的是对照组成纤维细胞数高峰为术后第7天，激光组为术后第10天。成纤维细胞是肉芽组织内的主要细胞，由成纤维细胞数变化趋势图可见，激光组愈合早期成纤维细胞增殖受到抑制，其增殖时相延长。成纤维细胞计数情况反映出激光组愈合过程中肉芽组织增长速度慢于对照组。

　　成纤维细胞是创伤愈合过程中主要的TGF-β1分泌细胞。超脉冲CO2激光手术后创口愈合过程中生长因子TGF-β1表达阳性细胞的定量研究结果表明，在激光组创缘表皮TGF-β1表达阳性的持续时间更久，表现出明显的延迟;而真皮中愈合早期激光组阳性细胞数多，愈合中期则少于对照组且持续时间长，这一现象可能是因为早期转化而来的成纤维细胞数与组织对损伤的应激反应程度相关，而在愈合的中期由于对照组肉芽组织形成速度快，成纤维细胞增殖速度快、数量多，而激光组因热损伤成纤维细胞增殖受到部分抑制故恢复缓慢。愈合中晚期，对照组表达阳性细胞数急剧下降，而激光组则经历一个缓慢消减期，时相明显延长，也就是成纤维细胞消减时相在中晚期明显延长，上述的各时相共同叠加的结果导致创口延迟愈合。此外，本研究中显示创口表皮TGF-β1表达阳性细胞在第10天时已经转阴，而创口真皮内在第20天时仍然存在TGF-β1表达阳性细胞，说明创口真皮成纤维细胞仍然在重塑改造，符合创口疤痕愈合的病理生理过程;同时本实验也表明第20天时，激光组真皮层TGF-β1表达阳性细胞明显多于对照组(P<0.01)，也说明了激光不仅干扰了创口的愈合，而且对后续疤痕重塑产生负面的影响，促进了创口疤痕增生。

　　综上所述，由于激光对组织的热损伤作用，成纤维细胞的增殖受到抑制，分泌TGF-β1阳性细胞功能减弱，而TGF-β1的分泌又进一步影响激光手术创口的愈合。同时，创口愈合后成纤维细胞分泌TGF-β1延续时间长，干扰了疤痕的重塑，促进创口疤痕增生。

　　临床上激光的能量选择是多水平的。同样的激光器，用于眼袋整形的激光功率一般在12 W以上，脉冲时间在10 min以上[4]，而我们的实验只涉及到一种水平的激光能量，这主要由于用来切割的组织不同——眼袋整形切割的组织为脂肪组织，由于切割的范围不同，脉冲时间也有明显的差异。尽管我们的激光参数设置单一，但其切口组织气化、出血、愈合情况均与临床类似。激光的波长、能量高低、脉冲模式、脉冲时间、脉冲频率和激光切割时间都是涉及到组织损伤范围的重要参数，所以有待从不同方面更进一步研究超脉冲CO2激光手术创口愈合延迟的机理。

　　【参考文献】

　　[1] George Romanos， Chong Huat Siar， Kh Ng， et al. A preliminary study of healing of superpulsed carbon dioxide laser incisions in the hard palate of monkeys[J]. Lasers in Surg Med，1999，24(5)：368-374.

　　[2] Silverman EB， Read RW， Boyle CR， et al. Histologic comparison of canine skin biopsies collected using monopolar electrosurgery，CO2 laser，radiowave radiosurgery，skin biopsy punch， and scalpel[J]. Vet Surg，2007，36(1)：50-56.

　　[3] Liboon J， Funkhouser W， Terris DJ. A comparison of mucosal incisions made by scalpel，CO2 laser，electrocautery，and constant-voltage electrocautery[J]. Otolaryngol Head Neck Surg，1997，116(3)：379-385.

　　[4] 叶信海，陈熙，王开元，等. 超脉冲CO2激光辅助矫治下眼袋[J].组织工程与重建外科杂志，2007，3(6)：330-332.

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