【摘要】目的 探讨用水蛭素预防眼内增生性病变的效果。方法 建立实验性眼外伤动物模型，随机分为实验组和对照，在实验组玻璃体腔内注入小剂量水蛭素(每只眼10U)，对照组采用空白对照组，分别观察2组1、3、5、7、14d玻璃体混浊及眼底增殖膜形成情况。结果 实验组1、3、5d玻璃体混浊及眼底增殖膜形成明显低于对照组(P<0.05)。结论 水蛭素对眼内增生性病变形成早期有预防作用。
【关键词】水蛭素;眼内增生性病变;眼外伤
【中图分类号】R776.4 【文献标识码】A
【文章编号】1003-5141(2000)04-0265-02
Primary observation of the preventive function of hirudin against proliferative viteoretinopathy
YUAN Xiao-Hui,WANG Wan-Jie,ZHENG Yan-Lin,JIANG Ji-Kai，ZENG Qing-Hua
(Department of Ophthalmology,Affiliated of Chengdu Traditional Chinese Medicine Univerity,Chengdu 610072,Sichuan Province,China)
【Abstract】Objective To study the effect of hirudin on preventing the formation of proliferative viteoretinopathy(PVR).Methods Experimental animal models of traumatic eyes were built up and randomly divided into the experimental group and the control group,and small dose of hirudin (10 units per eye) was injected into the eyes in the control group.The formation of vitreous opacity and proliferative membrane of the two groups were observed on the first day,the third day.the fifth day,the seventh day and the fourteenth day respectively.Results In the experimental group,the formation of vitreous opacity and proliferative membrane were much milder than in the control group on the first,third and fifth day.Conclusion Hirudin can prevent the early formation of proliferative viteoretinopathy.
【Key words】hirudin;proliferative viteoretinopathy;traumatic eye
水蛭是一味传统中药，首载于《神农本草经》，其主要功效为破血逐瘀。有效成分为水蛭素，目前国外主要用于血栓形成的防治。本实验将低浓度的水蛭素用于实验性眼外伤的动物模型中，初步观察水蛭素预防眼内增生性玻璃体视网膜病变(proliferative viteovetinopathy,PVR)的形成，并探讨其作用机理。
1 材料和方法
1.1 动物 健康日本大耳白兔24只，体重2.5kg左右，雌雄不限，随机分为实验组和对照组，其中实验组10只兔20只眼，对照组14只兔28只眼。
1.2 实验方法 苯巴比妥静脉麻醉，按每公斤体重75mg的剂量从兔耳廓静脉注入。在角膜缘后4mm作平行于角膜缘的穿通伤口约5mm大小，轻压切口，使少许玻璃体脱出。然后取兔自身血0.2mL注入玻璃体腔内，同时实验组每只眼分别注入10单位水蛭素于玻璃体腔内。伤口不缝合，滴氯霉素眼液于结膜囊内，分别观察1、3、5、7、14d实验组和对照组玻璃体混浊及眼底增殖膜形成情况。分别于伤后1、3、5、7、14d随机处死实验组和对照组各2只兔供其他检查。
1.3 观察指标 玻璃体混浊程度分级：“”玻璃体混浊，眼底窥不清;“”玻璃体混浊，仅隐约可见视网膜血管;“”玻璃体混浊轻度，可见视盘及血管;“+”玻璃体细点状混浊，眼底清楚;“0”玻璃体无混浊[1]。统计学处理用χ2检验。
1.4 判定标准 好转：玻璃体混浊程度较前次减少“+”或“+”以上者。
2 结果
造模后玻璃体混浊情况见表1，结果表明：造模后1、3、5d，实验组玻璃体混浊
及眼底增殖形成明显低于对照组，有显著性差异(P<0.05)，造模后7、14d 2组比较无明显差异，见表2。实验组无1眼发生牵引性视网膜脱离，对照组中有10眼发生牵引性视网膜脱离，发生率为36%.
表1 造模后玻璃体混浊情况
Table 1 The results of vitreaes opacity after
building up the model
Degree Control group Experiment group
1d 3d 5d 7d 14d 1d 3d 5d 7d 14d
12 7 3 1 1 2 0 0 0 0
11 12 9 3 1 9 6 1 0 0
5 3 6 10 3 6 5 5 2 0
+ 0 1 1 2 7 3 5 6 6 4
- 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0
表2 实验结果
Table 2 The results of experiment
1d 3d 5d 7d 14d
E C E C E C E C E C
Total 20 28 16 24 12 20 8 16 4 12
Effective 18 16 8 6 10 8 2 7 2 5
P <0.025 <0.05 <0.05 >0.5 >0.5
Note:E=experiment group，C=control group
3 讨论
3.1 中医对眼内增生性病变的认识 祖国医学认为，眼内出血、炎症所致的增生性病变为一种瘀滞表现，易形成瘀血、死血、干血，日久而成积聚、凝块，故当破血逐瘀、软坚散结。《神农本草经》云：“水蛭味咸平，主逐恶血、瘀血、月闭;逐血瘀积聚”。因而水蛭是治疗眼内增生性病变的首选药物之一，其有效成分是水蛭素。
3.2 现代医学对眼内增生性病变的认识 关于眼内增生性病变的发病机理报道很多，一般认为是视网膜及周围组织损伤后(如裂孔、外伤和血管炎等)，导致血-视网膜屏障被破坏，血小板与损伤部位接触释放大量血源性细胞因子(如转化生长因子-β、血小板源性生长因子)及其他生物活性物质，血小板源性生长因子能吸引成纤维细胞、神经胶质细胞和色素上皮细胞，刺激平滑肌细胞、血管内皮细胞和成纤维细胞增殖，而巨噬细胞也能分泌转化生长因子-β、血小板源性生长因子和成纤维细胞生长因子，从而促进炎症、增生反应和纤维膜形成[2，3]。
3.3 水蛭素预防增生性玻璃体视网膜病变的机理 水蛭素是1955年Markwardt首先从医用水蛭唾液中分离纯化的一种多肽，并于1970年确定它是凝血酶的特异抑制剂[4]。水蛭素对凝血酶有很高的亲和性，它是凝血酶的最强有力的天然抑制剂，它们以1∶1的方式形成紧密的非共价相结合的可逆的复合物，这样凝血酶便失去了裂解纤维蛋白原的能力，阻止了纤维蛋白的凝固。此外，水蛭素也阻止凝血酶催化的凝血反应(如因子Ⅴ、Ⅷ、Ⅻ的活化)及凝血酶诱导的血小板反应。因此，我们应用水蛭素防止外伤后眼内出血所致的增生性病变。将小剂量水蛭素注入眼外伤动物模型玻璃体腔内，发现实验组早期PVR形成明显低于对照组，经统计学处理有显著性差异(P<0.05)，且实验组无1眼发生牵引性视网膜脱离，而对照组牵引性视网膜脱离发生率为36%.从实验结果我们推测：水蛭素直接注入玻璃体腔后，抑制了由凝血酶催化的凝血反应及纤维蛋白原的凝固，抑制由凝血酶诱导的血小板反应，从而抑制了色素上皮细胞、神经胶质细胞及成纤维细胞的增殖，阻止了增殖膜的形成，达到了防治眼内增生性病变形成的目的。
眼内增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是视网膜脱离手术失败的主要原因，也是眼外伤、视网膜血管炎常见的严重并发症之一，目前尽管PVR的手术成功率已显著提高，但许多患者术后视力恢复不理想，且复发率高。随着对PVR发病机理认识的不断深入，许多学者已开始尝试用药物来防治PVR[5]。因此，我们应用中医理论采用水蛭素预防治PVR形成，对临床防治PVR形成开辟新的途径。
由于本实验未连续用药，故预防后期眼内增生性病变形成的作用不理想，有待进一步完善，以便为水蛭素成为临床防治PVR的有效药物提供可靠依据。
基金项目：四川省教委重点科研基金资助
作者简介：袁晓辉，女，1964年4月出生。1985年毕业于成都中医药大学医学系。毕业后在成都中医药大学附属医院从事眼科临床工作，现任眼科副主任医师，曾在全国性杂志发表论文数篇，主要从事斜视、弱视、近视的防治工作及白内障、青光眼的临床工作。电话：028-7769902-2520
作者单位：袁晓辉(成都中医药大学附属医院眼科 四川省成都市，610072)
王万杰(成都中医药大学附属医院眼科 四川省成都市，610072)
郑燕林(成都中医药大学附属医院眼科 四川省成都市，610072)
曾庆华(成都中医药大学附属医院眼科 四川省成都市，610072)
蒋纪恺(重庆医科大学检验系)
参考文献
1，李凤鸣.眼科全书(中册)[M].北京：人民卫生出版社1996∶2421.
2，刘 文.视网膜前膜研究新进展[J].国外医学眼科学分册1995;19(4)∶219.
3，石一宁.增殖性玻璃体视网膜病变的免疫机制[J].国外医学眼科学分册1995;19(4)∶239.
4，Markwardt F.Hirudin as an inhibitor of thrombin,Methods enzymelog 1970;19∶924.
5，武志峰.增殖性玻璃体视网膜病变的药物防治[J].国外医学眼科学分册 1997;21(1)∶51. |
