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增殖性糖尿病视网膜病变眼内组织纤溶酶原激活物及其抑制物的表达与VEGF表达的相关性研究

http://www.cnophol.com 2007-12-26 16:34:08 中华眼科在线

 

    0引言

    视网膜新生血管发生的重要特征就是血管内皮细胞的分裂增生。近年来的研究结果显示,视网膜新生血管的发生发展与血管内皮生长因子(VEGF)的调控密切相关。现已明确细胞因子是通过活化靶细胞膜表面特定的受体,启动不同的信号传导通路而发挥其生物学效应的。然而,视网膜新生血管的形成是一个十分复杂的病理生理过程,其不仅表现为血管内皮细胞的分裂增生,同时还会伴有周细胞及基底膜等的一系列改变,因此,细胞因子不应被看作是视网膜新生血管发生的唯一因素。VEGF本身是一个多功能的细胞因子,它可激活血管增生的主要过程,包括血管内皮细胞的分裂、游走、血管通透性的增加以及某些相关酶活性的增加。这些活动均贯穿了新生血管形成的全过程,而组织纤溶酶原激活物(t-PA)及纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)在新生血管生成的过程中具有重要的作用。我们探讨在PDR中t-PA及PAI的表达以及与VEGF表达的相关性。

    1材料和方法

    1.1材料 VEGF酶联免疫试剂盒 (Sigma公司),t-PA酶联免疫试剂盒(瑞典),PAI酶联免疫试剂盒(瑞典),Metretech 960型酶标仪(450nm) (美国)。所有实验组患者均为2型糖尿病伴有PDR。男14例,女21例,共35例35眼。平均年龄为63.3±10.6岁。对照组玻璃体标本取自特发性黄斑裂孔手术患者共20例20眼。男6例,女14例。平均年龄61.4±8.7岁。所有实验组及对照组玻璃体标本均取自玻璃体手术中。常规行经睫状体扁平部的三孔闭合式玻璃体切除术,在关闭灌注的情况下以玻切头进入眼内至玻璃体腔中央,切割并吸引玻璃体约0.3mL,取出玻切头,以注射器将切割之玻璃体反推入无菌的0.5mL Eppendorff离心管。-20℃冰箱保存备用。

    1.2方法 将玻璃体标本离心后,取上清液进行检测分析。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定实验组及对照组玻璃体标本中VEGF、t-PA和PAI的浓度。结果判定为每个标准品和标本的A值应减去零孔的A值,绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,A值为纵坐标,连接各标准品坐标点。通过玻璃体及房水标本的A值可在标准品曲线上查出其相应浓度。

    统计学处理:采用样本均数±标准差( )及两样本均数的t检验及一元相关和回归分析。

    2结果

    2.1玻璃体中VEGF、t-PA和PAI的表达 PDR眼玻璃体中VEGF、t-PA和PAI的浓度。t-PA对照眼玻璃体标本中有2例未检出。表明PDR眼内,t-PA和PAI均有显著的表达。

    2.2 VEGF表达与t-PA及PAI表达的相关性 t-PA的表达与VEGF的表达显著相关(x:VEGF浓度,y: t-PA浓度),P <0.001。PAI的表达与VEGF的表达显著相关(x:VEGF浓度,y: PAI浓度),P <0.001。

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(来源:国际眼科杂志)(责编:xhhdm)

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