1引入特异性物质阻断抑制信号传导

    抑制信息经受体传入神经元细胞后将RhoA激活，再由活化的RhoA与下游ROCK结合，取代ROCK Ｃ末端自我抑制区，激活其催化区，使其活化，并进一步使肌球蛋白和肌球蛋白磷酸酶磷酸化，抑制肌球蛋白磷酸酶活性，活化肌球蛋白，促使应力纤维形成，调节肌动－肌球蛋白Ⅱ的收缩力，对肌动－肌球蛋白系统造成影响，导致生长锥塌陷，轴突再生受到抑制[18]。

    RhoA是细胞内传导抑制信号、参与信号级联放大过程中及调控细胞支架动力学的关键物质[25-27]。对其进行封闭，可有效阻断再生修复过程中的抑制作用。有研究表明，从肉毒杆菌中提取的C3酶，可对RhoA的效应结构域进行ADP核糖基化作用，从而抑制其与信号传导下游的效应物发生相互作用，阻断信号的传导[28,29]。经C3酶处理后的初级视网膜神经元，即使是位于髓磷脂相关糖蛋白和髓磷脂底物上其轴突仍然可生长延长[16]。

    应力纤维的形成是由Ca2+所调控的，Ca2+的调控信息则通过ROCK（Rho相关丝氨酸/苏氨酸激酶）介导，嘧啶衍生物Y-27632可阻断ROCK对Ca2+调控信息的感受，阻止应力纤维形成，避免影响肌动－肌球蛋白系统，生长锥正常生长，轴突再生[19,30-32]。

    2抗体封闭抑制蛋白

    Schwab等[33]研究发现单克隆抗体IN-1能够识别中枢神经系统髓磷脂中大小为250/30kDa可对轴突生长有抑制作用的糖蛋白。使用IN-1封闭此糖蛋白后，可促进轴突再生[20,34,35]，但是再生轴突的数量比较少，因为在中枢神经系统髓磷脂中还存在其他的抑制蛋白[2,36,37]。

    Huang等[21]认识到，如想更好的促进中枢神经的轴突再生，必须将这些抑制蛋白一起封闭，并设计了一种可以同时封闭多种抑制蛋白的方法。他们将富含髓磷脂和一些抑制糖蛋白的小鼠脊髓制成匀浆后对成年雌性BALB/c小鼠（8～10周龄）每周两次进行免疫，3wk后在T9（胸9）水平将脊髓对半切开，使双侧的皮质脊髓束均受损。再继续每周两次免疫3wk后，他们观察到轴突生长的最长长度在不同的小鼠间为5～11mm不等，但大部分都达到了6mm，一小部分为11mm。通过使用富含髓磷脂和一些抑制糖蛋白的小鼠脊髓匀浆对成年小鼠自身免疫系统进行刺激，从而产生可针对多种抑制因子作用的多克隆抗体，在损伤后使脊髓轴突再生增强。

    3基因敲出

    通过基因敲出，可去掉特定基因编码的特定蛋白，从而关闭该蛋白所产生的生物效应。研究证实，关闭了抑制效应的抑制蛋白、受体蛋白缺失突变体，其中枢神经元轴突可有效再生。

    Simonen等[22]使用PGK-neo基因将nogo 基因的2个外显子和1个内含子替换掉，制作出仅 Nogo-A缺失的基因敲出小鼠[6,38]，并观察到将其胸部脊髓对半切开2wk后，Nogo-A基因敲出小鼠与同类野生型小鼠相比，在受伤部位，有更多的皮质脊髓束纤维长出，而未受损的皮质脊髓束纤维也大量发芽。

    将nogo 基因中特异编码Nogo-A/B的外显子直至其下游的ATG始端的整个基因组片断删除，制作出Nogo-A/B缺失突变小鼠，通过对轴突长度的测量，Zheng等[39]发现，用Nogo-A/B缺失突变小鼠的髓磷脂做底物比用同种野生型小鼠的髓磷脂做底物对取材于出生后7d小鼠的小脑神经元轴突生长的抑制程度，降低了1/4。

    Yamashita等[40,41]证实p75NTR跨膜蛋白是将神经元细胞外的信息传给细胞内Rho的信号传导要素，当细胞外的抑制因子结合到由NgR, p75NTR和LINGO-1组成的复合受体[1.4.11.14.15]时， p75NTR细胞内的结构域作用于RhoA[41]，从而实现抑制信号由细胞外进入细胞内。将p75敲出的突变小鼠与同种野生型小鼠相比，其脊髓背根神经节细胞（dorsal root ganglion neurons，DRGN）可明显克服髓磷脂的生长抑制作用[11]。

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