毛晓春 李贵刚 张虹 华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科,武汉 430030
【摘要】目的:探讨氮酮(AZONE)促进脂质体介导质粒DNA 转染兔角膜内皮细胞的作用及其对细胞活性的影响。
方法:采用细胞培养方法,利用绿色荧光蛋白基因做报告基因,配制不同转染液,脂质体联合pEGFP-N1、氮酮联合脂质体及pEGFP-N1、氮酮联合pEGFP-N1 、单纯pEGFP-N1、单纯脂质体、单纯氮酮,分别处理兔角膜内皮细胞,荧光显微镜观察细胞中绿色荧光蛋白的表达。用RT-PCR方法检测EGFPmRNA表达情况。采用MTT法研究不同转染液对细胞活性的影响。
结果:单纯氮酮、单纯脂质体及对照组处理的细胞不表达绿色荧光蛋白。氮酮联合脂质体及pEGFP2N1 对兔角膜内皮细胞的转染效率为42.6%;脂质体联合pEGFP2N1 组的转染效率为22.4%;氮酮联合pEGFP-N1 组的转染效率为7.2 %。单纯质粒组的转染效率为1%。氮酮加脂质体加PEGFP-N1组转染效率高于其他转染组(P <0.01)。各组转染液对角膜内皮细胞活性无影响。
结论:氮酮可促进脂质体介导质粒DNA 转染兔角膜内皮细胞,在有效的转染浓度下对细胞无明显毒性,有望成为促进角膜内皮细胞基因转染的新型试剂。
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