基础 1956 PO0139
TGF-β1对培养牛小梁细胞生长及胶原合成的影响
马君择 张德秀 熊全臣
西安交通大学第二医院眼科 710004
目的:本研究通过建立体外培养牛眼小梁细胞的方法,观察转化生长因子-β1对体外培养的牛眼小梁细胞的生长抑制作用和胶原合成的增强作用,探讨TGF-β1对房水引流的调节作用及在青光眼的发病机制中的意义。
方法:(1)体外培养牛眼小梁细胞,并采用免疫组化法(NSE, VIII因子相关抗原及波形蛋白染色),光学及电子透射显微镜观测等方法对原代及传代培养的小梁细胞进行形态学及生长特性的观察和细胞鉴定。(2)取传三代的小梁细胞以含不同浓度TGF-β1的培养液进行孵育,TGF-β1终浓度分别为0.5、1.0、1.5ng/ml,孵育时间为24h,然后采用MTT比色法观察小梁细胞生长情况,并用化学方法氯胺T法检测培养液中羟脯氨酸含量间接推导胶原含量及变化。
结果:①牛眼小梁细胞培养成功,成活率80-100%,②TGF-β1明显抑制小梁细胞的生长,呈浓度依赖性,TGF-β1同时引起培养液中HYP含量随浓度依次增高;
结论:①体外培养牛眼小梁细胞技术是研究小梁细胞特性的重要实验技术。②TGF-β1可以抑制小梁细胞的生长,并且促使TM细胞胶原合成增强。提示TGF-β1的异常表达可能在青光眼的发病中具有重要的意义。
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