视光学             2531                                      PO0710

　　暗光对豚鼠锥细胞视蛋白表达的影响研究

　　李瑾 褚仁远 瞿小妹 胡敏 笪翠弟

　　复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科  200031

　　目的：观察暗光对豚鼠锥细胞视蛋白表达的影响。

　　方法：出生二周豚鼠20只,分为正常对照组(n=10)，暗光组(n=10)，正常对照组按自然亮暗周期饲养，暗光组光照度为20lux。四周后取眼球行RT-PCR技术检测神经视网膜M-视蛋白和S-视蛋白的mRNA表达，并进行豚鼠视网膜铺片后免疫组织化学方法观察两种视蛋白的分布和表达密度，一抗为兔抗鼠红/绿锥视蛋白抗体或蓝锥视蛋白抗体，二抗为羊抗兔IgG带488荧光抗体。以Leica光学显微镜和Leica共聚焦显微镜观察豚鼠视网膜腹侧（下方）和背侧（上方）及中央区的锥细胞视蛋白的表达。

　　结果：正常豚鼠的视网膜短波敏感锥细胞（Short wave-length sensitive opsin, S-opsin）分布为腹侧（下方）多于背侧（上方），中央密度最高；豚鼠的中波敏感锥细胞（Medium wave-length sensitive opsin ,M-cone）分布在背部(上方)多于腹侧(下方)，中央密度最高；正常组S-opsin的表达密度：下方为5691.66 ±412.22mm-2，上方为808.33±305.88mm-2；中央为10216.67±1151.94 mm-2。暗光组：下方为8241.67 ±326.02 mm-2；中央为: 15541.67 ±2561.77mm-2，上方为1175.00±195.98 mm-2；正常组M-opsin的表达密度：上方为9480.83 ±584.07 mm-2，中心为12046.67±584.07mm-2，下方为1458.33±242.93mm-2；暗光组：上方为10825.00±1357.89 mm-2，中心为: 15483.33 ±779.08mm-2，下方为4137.50 ±482.95 mm-2。RT-PCR检测示M-视蛋白的相对光密度值为1.23±0.08(暗光组)，0.67±0.10(对照组)，S视蛋白的相对光密度值为1.15±0.07(暗光组)，0.52±0.06(对照组)。暗光组与对照组相比，M视蛋白和S视蛋白的mRNA表达均增加，两因素方差分析示差别均有统计学意义（均P<0.01）。免疫组化结果提示暗光使豚鼠视网膜三个观察区域M-opsin和S-opsin的表达均较正常对照增加，差别均有统计学意义（均P<0.01）。

　　结论：暗光下豚鼠M-opsin和S-opsin的表达增加。

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