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猕猴眼球超微结 构的研究

http://www.cnophol.com 2009-9-4 10:22:16 中华眼科在线

  摘要 目的探讨非人灵长类动物猕 猴眼球的超微组织结构,为研究提供参考。

  方法3只猕猴6只眼,透射电镜下观察。

  结 果 猕猴眼角膜分上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层和内皮细胞层。虹膜组织由前后色 素上皮层和基质层组成。睫状体由无色素上皮层、色素上皮层以及基质组成。视网膜组织分 为外层的色素上皮层和由9层所组成内层的神经感觉视网膜。猕猴眼球的超微组织结构与人 类基本相同。

  结论猕猴为最理想的实验动物。

  分类号 R77 R332,9

  The st udy of ultramicro-structure of rhesus mo nkeys’ eyeballs

  Wang Guiqin Dong Yali Yuan Jiaqin

  (International Intraocul ar Implant Training Centre,Tianjin Medic al

  University,Tianjin 300070)

  Abstract O bjectiveTo study the ultramicro-struct u re of rhesus monkeys’ eyeballs of non-hu man primates.MethodsSix eyeballs of 3 mo nkeys were enucleated.The samples of cor nea,iris,ciliary body,retina were fixed immediately in 2.5% glutaraldehyde solut ion,postfixed in osmium tetroxide 1%,deh ydrated through a graded series of alcoh ol, and embedded in Epon 812.Specimens were observed by transmiss ion electron microscope (TEM).ResultsT he cornea of rh esus monkeys’ eyes consisted of epitheli um,Bowman layer,stroma,Descemet membrane and endothelium.The tissue of the iris w as composed of the anterior pigmented la yer,the posterior pigmented layer and st roma.The portion of the ciliary body con sists of the ciliary epithelium-the nonp igmented,the pigmented epithelium and st roma.The retina consisted of the outer p igmenta l epithelial layer and the inner neurose nsory retina composed of nine layers.The ultramicro-structure of cornea,iris,cil iary body and retina in rhesus monkeys’ eyes was similar to that in human being. ConclusionRhesus monkey is the most s ui table experimental animal as higher mamm al animal.

  Key words rhesus monkey eyeba ll ultramicro-structure

  目前眼科领域对实验动物正常组织超微结构的描述不多,为充实这方面的资料,本实验对正常猕猴眼球进行了详细的超微结构观察,以利今后研究。

  1 材料和方法

  1.1 动物:为福建省实验动物管理委员会检测达到普通质量标准的猕猴,在福建省计划生育研究所非人灵长类实验中心进行。选用全身状况良好,无传染病,无寄生虫等其它疾病的3只猕猴6只眼。年龄平均10岁,雄性2只、雌性1只,平均体重7.0kg。

  1.2 方法:眼球摘除后立即沿颞侧矢状面剖开眼球,取角膜、虹膜、睫状体、视网膜,分别投入2.5%戊二醛固定液内做前固定,1%四氧化锇溶液做后固定,梯度乙醇脱水,EPON-812环氧树脂包埋,LKB-V型切片机做超薄切片,厚度50~60nm,醋酸铀-柠檬酸铅双重染色,置JEOL-100CX透射电镜下观察。

  2 结果

  2.1 角膜:上皮细胞层,5~6层细胞,厚约24~28μm,细胞排列规则,细胞间桥粒连接,游离表面有短小的微绒毛,可见3种细胞。浅层1~2层扁平细胞,中层2~3层多角形细胞,基底层单层立方形细胞。前弹力层,由密集的不成束胶原纤维与无定形基质组成,厚约4.5~6.0μm,胶原纤维的密集程度低于基质层,并与基质层的胶原纤维相延续。基质层,由成束的胶原纤维板层紧密排列组成,层与层呈一定角度交错,结构清晰,板层间可见带有细长突起的角膜细胞。后弹力层(图1),均质状,厚约5~6μm,与内皮细胞紧贴。内皮细胞层,扁的长方形,厚约3μm,游离缘有短小的微绒毛。胞质内含丰富的线粒体、粗面内质网,前后胞膜下均可见饮液泡。部分内皮细胞的胞质中可见少量色素颗粒,相邻胞膜迂曲相嵌。

  图1 角膜基质层、后弹 力层和内皮细胞层 ×7500

  Fig.1 Corneal st roma,Descemet’s me mbrane and endothelium ×7500

  2.2 虹膜:前上皮层与后色素上皮层顶对顶排列(图2)。后色素上皮层,细胞呈柱状,胞核卵圆,基膜完整,胞膜内褶短而少,胞质含大量圆形色素颗粒,直径400~1000nm,粗面内质网、线粒体分布于色素颗粒间。前上皮层,细胞扁方形,卵圆形的胞核,胞质含色素颗粒,可见高尔基复合体、短带状粗面内质网、线粒体,中等数量核糖体。细胞的基底侧伸出数层舌状突起,为瞳孔开大肌,突起内含平滑肌肌丝,卵圆形线粒体,并有密斑、密体。瞳孔开大肌外有薄层结缔组织,可见小血管与前上皮层相邻,血管外有厚而完整的基底膜,为血-房水屏障的一部分。基质,内含少量胶原纤维,细胞成分散在,有单核细胞、色素细胞、Clump细胞、成纤维细胞。瞳孔括约肌将基质分为前后两部分,前结缔组织层较疏松,血管丰富,神经纤维成簇存在。

  图2 虹膜前上皮 层与后色素上皮层结构×2225

  Fig.2 Iris struc ture of anterior epithelium and posterior

  pigmented epithelium ×2225

  2.3 睫状体:双层细胞呈顶对顶浪花样排列。无色素上皮层,细胞顶部较窄,基部膨大,基底部薄层基底膜外可见均一的细丝状物质,为玻璃体。细胞呈高柱状,核圆形,胞质内粗面内质网平行板层状排列,高尔基复合体发达,线粒体丰富,有成团的小泡状结构存在。游离缘丰富的细胞内褶,内褶内陷很深。色素上皮层,细胞呈立方形,核近圆形,胞质富有成簇微丝,顶部含大量的色素颗粒,基底部有丰富的胞膜内褶。基质较多胶原纤维,少量细胞成分,血管和神经纤维团,平滑肌内可见一些细胞器。从色素上皮细胞膜到血管内皮细胞膜,距离为0.7~2μm,可见色素上皮细胞膜、色素上皮基底板、疏松基质层、胶原纤维层、疏松基质层、内皮细胞基底板、血管内皮细胞膜,此为血-房水屏障(图3)。

  图3 血-房水屏障结构 ×9900

  Fig.4 Br uch’s membrane ×9900

  2.4 视网膜:Bruch膜(图4),脉络膜毛细血管内皮细胞与视网膜色素上皮细胞间的距离,宽约1.3~2.4μm。视网膜色素上皮由单层细胞排列构成,胞核卵圆形,胞质内丰富的核糖体颗粒及较大色素颗粒,细胞顶部伸出较多的微绒毛,包围视杆细胞的外节。视锥、视杆细胞外节膜盘结构规则,内节含较多纵形的长杆状线粒体。每个视锥细胞断面可见150~200个线粒体,视杆细胞可见15~20个线粒体。外界膜即视锥、视杆与Müller细胞间的连接结构完好。外核层5~6层胞核,内核层3~4层胞核,神经节细胞仅1层细胞核,各层细胞的细胞器结构清楚。外网状层、内网状层、神经纤维层等各处神经纤维内神经微管及微丝结构清晰,突触结构完好。内界膜结构清楚(图5),厚约0.9~1.4μm,基底膜薄而连续完整,由微细的微丝无序排列构成,向玻璃体面平滑,向视网膜面有Müller细胞突起伸入基底膜中,因而呈凹凸起伏状。

  图4 Bruch膜 ×9900

  Fig.3 Blood-aqueous barrie r ×9900

  图5 视网膜内界膜结构 ×7500

  Fig.5 The internal limitin g membrane of the retina ×7500

  3 讨论  猕猴为哺乳纲、灵长目、猴科、Macaca属、热带和亚热带动物,在生物进化、解剖结构和生理机能上都与人类相近。猕猴,雄性4~4.5岁成熟,雌性3.5~4岁成熟,大约相当于人类18岁性成熟,猕猴的发育速度几乎4倍于人类[1],正常情况下寿命可达25~30年。

  猕猴大脑发达,视觉敏感,黄斑部除有视锥细胞外,还有视杆细胞。猴有立体视觉、色觉、双目视力[2],占有其它实验动物所不能比拟的独特的重要地位。

  透射电镜结果显示,正常猕猴眼的角膜、虹膜、睫状体、视网膜组织的超微结构相似于朱秀安[3]描述人眼组织的超微结构。作为高等动物,非人灵长类猕猴为最理想的实验动物。因此,掌握猕猴眼不同组织的正常超微结构,才能对病理状态作出判断,尤其对临床前的实验研究,将提供有价值的参考资料。

  1,Boothe RG,Louden TM,Lambert  SR.Acuity and contrast sensitivity in m onkeys after neonatal intraocular lens i mplantation with and without part-time o cclusion of the follow eye.Invest Ophtha lmol Vis Sci,1996,37∶1520

  2,叶智彰,主编.猕 猴解剖.北京:人民卫生出版社,1995.173-177

  3,李风鸣,主编.眼科全书. 北京:人民卫生出版社,1996.124-168

  收稿:1999-01-05

  修回:1999-09-18

(来源:互联网)(责编:xhhdm)

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