屈娅 夏斌 徐海伟 杨军 阴正勤
重庆第三军医大学西南眼科医院 重庆大学生物工程学院 400038
目的:本研究利用电融合芯片进行同源细胞和异源细胞融合,摸索不同细胞之间的融合条件,并对融合细胞进行生物学特性分析,为鼠成体细胞和胚胎干细胞融合获得诱导多能干细胞研究鉴定基础。 方法:在基于重庆大学生物工程学院“微流控制技术和低压直流电融合技术”基础上,将HEK293细胞与HEK293细胞、HEK293细胞与鼠胚胎成纤维细胞(MEF)、HEK293与NIH3T3细胞分别进行同源细胞和异源细胞融合,记录排队及融合过程图像,并对融合细胞进行核型分析等生物学特性分析。
结果:(1)在3VP-P左右排队电压条件下,各种细胞能够较好地两两排队。(2)施加不同的融合电压,各种同源及异源细胞之间可实现理想融合。(3)细胞活性分析实验证明电融合后细胞能够保持良好活性。(4)HEK293与NIH3T3细胞融合后染色体分析发现具有典型的四倍体核型。(5)初步完成了NIH3T3(鼠胚胎成纤维细胞)与鼠胚胎干细胞的排队及融合,证明采用低渗可以解决两种细胞体积差异的问题。
结论:利用电融合芯片技术能够实现同源及异源细胞之间的排队及融合,融合细胞具有两亲本细胞的生物学特性。
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