作者：仇长宇　胡莲娜　李建中　闫洪欣　罗灵　赵军　李志生

    【摘要】目的：研究大鼠在航天推进剂四氧化二氮染毒后多焦视网膜电图改变。方法：正常雄性Winstar大鼠，用15mg四氧化二氮溶液ip染毒，1h及7d检查的大鼠为6～10只，在晚上固定时间进行苯巴比妥钠溶液ip麻醉及多焦视网膜电图检查。用Microsoft Excel自带的统计软件对数据进行分析。 结果：四氧化二氮15mg染毒后1h组的大鼠与正常大鼠的MERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异具有显著意义（P 值0.005~0.034，P ＜0.05)；染毒后7d的大鼠与正常大鼠MERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异没有显著意义；两组染毒大鼠与正常大鼠MERG的总和波及各环b波的波幅值的差异均无显著意义。染毒后1h组与染毒后7d组之间的 MERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异其部分指标具有显著意义（P 值0.006～0.017， P ＜0.05），其余部分指标的差异无显著意义；而两组之间波幅值的差异无显著意义。结论：1h及7d四氧化二氮染毒大鼠的MERG潜伏期的差异其部分指标具有显著意义，MERG总和波及各环b波潜伏期有不同程度的差异，其影响随着时间延长而减弱。

    【关键词】  多焦　视网膜电图　大鼠　四氧化二氮

    Features of multifocal electroretinogram of N2O4 injected mice at different time

    Abstract  AIM: To record ｍultifocal electroretinogram from N2O4 injected mice at different time. In order to provide a found for further study.  METHODS: Six to Ten mice which were injected by N2O4 in each group were studied for recording multifocal electroretinogram in the same time in the evening after different time from injected.  RESULTS: The latency and amplitude density of b wave of each ring of multifocal electroretinogram was steady. The latency of b wave of each ring of multifocal electroretinogram of each group varies to each other . But the difference of the amplitude of b wave of multifocal electroretinogram of each ring between each group had no significance. CONCLUSION: Recording multifocal electroretinogram of N2O4 injected mice has wide use in science and clinic research.

    · KEYWORDS: multifocal electroretinogram; mice; N2O4

    0引言

    四氧化二氮（N2O4）是军事及商业航天器使用的推进剂之一，其中毒是航天器事故救护的一个重要方面，有关N2O4中毒的全身救护的研究已经有很多报道，但是。有关N2O4中毒的视网膜及视神经功能损伤及预后估计方面的相关研究未见报道。多焦视网膜电图（MERG）是临床诊断和研究视网膜疾病的重要方法之一。大鼠是比较常用的实验动物，为了科研及临床工作的需要，我们研究了N2O4中毒后不同时间点的大鼠多焦视网膜电图改变如下。

    1材料和方法

    1.1材料 Ⅱ级雄性Winstar大鼠(北京实验动物中心提供)，体质量(200±20)ｇ，暴露于自然光明、暗交替照射及室温条件下，给予充足清洁饮水、摄食。每晚在固定的时间进行麻醉及视觉电生理检查。用不同剂量的N2O4溶液对大鼠进行ip染毒，注射N2O4后，有的动物因为中毒而死亡，所以每个剂量实际检查的大鼠为6～10只。重庆医疗设备有限公司生产的国特GT2000NV视觉电生理检测仪，配用21英寸彩色显示器(SAMSUNGSyncMaster1100P)，最大亮度140cd/m2，分辨率640×480，对比度96%，刷新频率127Ｈz。

    1.2方法 刺激图形采用同心圆形刺激图形，刺激单元数63个，最大视角29.7°，第1环到第5环面积比为1∶11∶20∶49∶105，各层的视角分别为4.09°，10.79°，15.57°，21.80°，29.75°，变形指数为1.0，刺激时亮度140 cd/m2，波形时间142ms，采样频率1kHz。放大器放大倍数4万，通频带1～75Hz，分16个循环记录MERG一级反应，每个循环记录47s。刺激颜色光白光。取暗适应2h的大鼠(染毒后1h检查的大鼠是在暗适应期间进行ip染毒)，20g/L苯巴比妥钠溶液7.5mL/kg ip麻醉，麻醉后固定于1个可以三维移动的动物实验台上。5g/Ｌ托品酰胺散瞳，滴加10g/Ｌ甲基纤维素后安放电极，其中记录电极为自制环形银电极，电极固定于大鼠左眼角膜缘处，针灸针改制的参考电极和地极，分别置于被检眼同侧颊部和尾部皮下。使动物的角膜缘平面与荧光屏平行，角膜顶点位于刺激野中心正前方，并且保证与刺激野中心距离为20cm，然后进行记录[1]。对a波和b波的潜伏期 (ms)、幅值(μV)数据进行分析。环形野分为以眼后极部为中心同心排列的5个环形，对b波的潜伏期 (ms)、幅值(μV)的数据进行分析。

    统计学处理：使用Microsoft Excel自带的统计软件对数据进行分析。

    2结果

    2.1 MERG的总和波及各环b波的潜伏期　 将N2O4染毒的大鼠的MERG的总和波及各环b波的潜伏期与正常大鼠MERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异用t检验方法进行比较，结果发现，15mg染毒后1h的大鼠与正常大鼠MERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异具有显著意义；而15mg染毒后7d的大鼠与正常大鼠MERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异没有显著意义（表1）。

    2.2 MERG的波幅值的差异 将染毒后不同时间的染毒大鼠的MERG的总和波及各环b波的波幅值与正常大鼠MERG的总和波及各环b波的波幅值的差异用t检验方法进行比较，结果发现，ip N2O415mg染毒后1h及15mg染毒后7d的大鼠与正常大鼠MERG的总和波及各环b波的波幅值的差异均无显著意义（表1）。

    2.3染毒后不同时间点的MERG比较 将15mg染毒后1h组及15mg染毒后7d组大鼠的MERG的总和波及各环b波的潜伏期及波幅值的差异用组间差异的t检验方法进行比较，结果发现，15mg染毒后1h组及15mg染毒后7d组之间的 MERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异有一半的指标其差异有显著意义，其余的指标的差异无显著意义；两组之间波幅值的差异均无显著意义（表1）。

    3讨论

    MERG是 1990年前后由Sutter等[2]提出的一种新的电生理检查技术 ，它是评价后极部视网膜以及黄斑区视功能的比较理想的工具。我们发现15mg染毒后1h组大鼠及15mg染毒后7d组的大鼠的MERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异具有显著意义[3]；而两组之间波幅值的差异无显著意义。经过与正常大鼠进行比较，发现其对潜伏期的影响会随着时间延长而减弱[4]。表明N2O4对大鼠多焦视网膜电图的影响主要表现在对MERG总和波及各环b波潜伏期的影响方面，而且其影响以染毒早期更为明显。这些结果将对N2O4中毒的救治具有一定的指导意义。为N2O4中毒后引起的视网膜功能损害的防治及进一步研究提供了客观的依据。

    【参考文献】

    1石力,张作明,李莉,郭群,龙潭,顾永昊,候豹可.正常昆明小鼠不同颜色光多焦点视网膜电图特点.第四军医大学学报,2003;18:1717-1719

    2 Vaegan SEE. Lateral interaction component and local luminance nonlinearities in the human pattern reversal ERG. Vision Res ,1990;30(5):659-671

    3丁建光,姜德咏,吴荣瀚,唐朝珍,李文生.兔视网膜不同缺血时间再灌注后ERG的变化.国际眼科杂志，2005;(4):659-662

    4胡莲娜,仇长宇,郭惠玲,李志生,孙轶军,王立华.挫伤眼球视功能的电生理评价.国际眼科杂志，2005;(4): 691-692