王宏彬 杨士成

　　北京友谊医院 美国国立卫生研究院 100050

　　目的：研究慢病毒介导的shRNA在小鼠脉络膜新生血管模型中对于不同眼组织的转染效率，为进一步的基因治疗提供有效性依据。

　　方法：利用pLenti-V5-H1-GFP.shRNA，pCMV-R8.2，pLP/VSVG 共转染293FT细胞，提取上清液，获取高浓度的lenti-GFP.shRNA.制作激光诱导的小鼠脉络膜新生血管模型，激光后1小时行玻璃体腔注射1ul慢病毒介导的GFP.shRNA。在一周时处死小鼠，行眼球冰冻切片，在荧光纤维镜下观察组织和细胞对于GFP基因的的转染效率，转染了GFP基因的细胞和组织将呈现绿色荧光。

　　结果：未行激光治疗的眼，玻璃体腔注射则眼组织不会转染GFP基因，视网膜下注射，则仅在注射部位可见色素上皮层转染。在激光治疗的视网膜激光斑附近，玻璃体腔和视网膜下注射均可见包括血管内皮细胞在内的视网膜，脉络膜全层对于绿色荧光基因的转染。

　　结论：在激光诱导的脉络膜新生血管模型中，利用慢病毒载体可以有效将目的基因转染到视网膜，脉络膜组织中。