【摘要】 目的 比较变应原结膜激发试验(CPT)观察指标与Abelson评判标准的评判结果的相符情况，试探临床工作中简便易行的判读方法。方法 对644例变态反应病患者进行特异性变应原结膜激发试验，记录 Abelson评判标准中四项观察指标并统计整理分析。同时进行变应原皮肤点刺试验(SPT)以及血清变应原特异性免疫球蛋白E(d1-sIgE)检测。结果 644例患者四项指标出现率分别为结膜充血(60.1%)、球结膜水肿(18.8%)、痒感(30.0%)、流泪(8.9%);各项指标与总分值的比较，球结膜水肿和痒感与总分值无显著性差异(P=0.175，P=0.609);吻合度检验仅球结膜水肿与总分值吻合度较强(κ=0.714，P=0.000)。结论 变应原结膜激发试验的不同的评判标准中，Abelson标准评判项目较多，且受主观影响，可以用球结膜水肿计分替代。
【关键词】 变态反应;变应原;结膜激发试验
Clinical analyses of conjunctival provocation tests with dermatophagoides pteronyssinus in 644 patients
LI Xiao-luan，MENG Wen-xia，WANG Yan，et al.
Department of Allergology，the First Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050031，China
[Abstract] Objective To investigate the difference between every criterion of allergen conjunctival provocation tests and the criterion propounded by Abelson.Methods We have observed 644 allergic outpatientes who were examed by allergen conjunctival provocation tests with specific allergen，and noted their clinic scores according to Abelson.Skin prick tests and serum specific immunoglobulin E determinations were detected at the same time.
Results The appearance ratios of four criterion were conjunctival hyperemia 60.1%，conjunctival chemosis 18.8%，itching 30.0% and tearing 8.9% separately.We compared every criterion and the totle scores，no statistical differences between conjunctiva chemosis or itching and the totle scores(P=0.175，P=0.609).But，only conjunctiva chemosis and the totle scores had strong agreement(κ=0.714，P=0.000).
Conclusion Instead of the criterion propounded by Abelson，the criterion of allergen conjunctival provocation test with specific allergen can be charactered with the scores of conjunctiva chemosis.
[Key words] allergy;allergen;conjunctival provocation test
结膜激发试验是一种在人为严格控制下用少量可疑致敏物激发临床症状，以观察试验物与变应病相关性的方法。该方法已有一百多年的历史，但是缺乏统一操作与评判标准，在西方评判标准就有许多种，其中被采用最多的有Abelson标准、Mller标准和EES标准，这些标准多采用计分法，观察指标较多。国内的标准主要是客观指标，以“+”计。我科近年来开展了大样本变应原结膜激发试验，进行详细的观察分析，力求从中探讨变应原结膜激发试验在临床工作中简便易行的判读方法，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例选择 随机选择2006年1月至2008年12月在我科就诊的变态反应性疾病患者中根据询问病史疑有过敏者644例，进行特异性变应原结膜激发试验，同时进行变应原皮肤点刺试验及血清特异性IgE(免疫球蛋白E)检测。所选病例参照相关诊断标准[3～5]，病程均在1个月以上，其中男358例，女286例;年龄最大74岁，最小4岁，平均(36.1±16.9)岁。
1.2 方法
1.2.1 试验前期准备 试验避开患者急性发作期以及饮酒后;试验前未进行免疫治疗;试验前2周未做过结膜激发试验;试验前停用眼部局部用药2周以上，停用全身用抗组胺药物1周及糖皮质激素类药物2周以上;遇有急性上呼吸道感染、变应性结膜炎以外的眼部疾患、佩戴角膜接触镜者待愈后2周进行结膜激发试验。
1.2.2 变应原结膜激发试验 专业检查室，室温约20 ℃，患者进入室内休息10 min，取端坐位，检查并记录双眼基础情况，确定无急性结膜疾病，双眼结膜状况无明显差异后进行激发试验。以微量移液管取10 μl阴性对照液(由ALK公司提供除无变应原蛋白外所含成分与变应原试剂相同)于患者一眼中，随即另以微量移液管取10 μl变应原试剂(为ALK公司提供屋尘螨变应原试剂15 000 HEP/ml以及北京新华联协和药业公司提供的变应原制剂：艾蒿、葎草、苍耳、梧桐等花粉以及交链孢菌、烟曲霉等真菌1∶100 w/v，其中艾蒿、葎草花粉1∶1 000 w/v)于另一眼下结膜囊中。患者闭目头后仰30 s，于激发后2、5、10、15 min观察记录四项观察指标。对照侧出现明显速发相反应或有迟发相反应者另作记录，不列入统计范围。
1.2.3 变应原皮肤点刺试验 试剂为ALK公司提供屋尘螨变应原皮肤点刺试剂以及北京新华联协和药业公司提供的变应原制剂：艾蒿、葎草、苍耳、梧桐等花粉以及交链孢菌、烟曲霉等真菌检测试剂，操作及评定标准参照厂家提供标准。
1.2.4 变应原特异性免疫球蛋白E(d1-sIgE)检测 采用Pharmacia公司Uni CAP系统-100型进行荧光酶联免疫法测定(所有试剂均为南京美瑞公司提供)，在Uni CAP系统-100型中自动完成。
1.3 观察及评价项目 详细观察并记录变应原结膜激发试验过程中结膜充血、球结膜水肿、痒感、流泪情况。分别记录各观察指标计分并计算总分值。结膜激发试验操作由我科医师专人进行，前2项指标由我科另一医师(第三方)进行双盲评判，后2项由患者主观评估(盲性)。
1.4 统计学处理 本文数据采用SPSS 13.0软件进行统计，采用配对资料的χ2检验。
2 结果
2.1 644例患者均有可疑过敏性疾病病史 皮肤点刺试验中皮肤反应出现(“+”及以上)者占79.5%，血清特异性IgE阳性者占20.2%。
2.2 变应原结膜激发试验各项观察指标及评分情况 644例患者四项指标出现率分别为结膜充血(60.1%)、球结膜水肿(18.8%)、痒感(30.0%)、流泪(8.9%)，各项指标与总分值的比较与吻合度检验见表1。表1 结膜激发试验Abelson评判标准各项观察指标分值与总分值的比较与吻合度检验
3 讨论
变态反应性疾病的发病率超过20%，且发病率呈逐年增高趋势。正确的诊断是治疗的基础，而查全查准变应原是变应性疾病诊断的关键。现在临床中采用的变应原检测方法通常是皮肤试验及血清IgE检测，均带有一定的局限性。结膜激发试验是一种在人为严格控制下用少量可疑致敏物激发临床症状，以观察试验物与变应病相关性的方法[1]。该试验能模拟自然发病状态，为诊断相关疾病提供了多时相、多角度观察机会[1]，其敏感性、特异性及有效性已得到许多学者的共识。其本质就是模拟结膜接触变应原的自然状态，人为制造出由一定量变应原引起的变应性结膜炎的急性发作，是IgE介导的Ⅰ型变态反应。其历史可以追溯到1873年Blackley在描述枯草热时记录了用花粉激发了结膜反应[2，3]，由于其在变态反应性疾病诊断中的特殊性，一百多年来不断有相关研究报道，但是缺乏统一操作与评判标准。在西方，统一操作与评判标准就有许多种，其中被采用最多的有Abelson标准[4～6]、Mller标准[6]和EES标准[7，8]，观察指标包含客观指标及主观指标，多采用计分法。国内的标准主要是客观指标，以“+”计。我科近年来开展了大样本变应原结膜激发试验，进行了详细的观察记录，并整理分析。
我们对644例根据询问病史疑有过敏者进行了相应的变应原结膜激发试验，采用的是一次法，所用变应原浓度与皮肤点刺试验相同，剂量是10 μl，接近平常时结膜囊中泪液的容量。我们参照Abelson评判标准的4项观察指标分别记录，观察发现4指标出现率分别为结膜充血(60.1%)、球结膜水肿(18.8%)、痒感(30.0%)、流泪(8.9%)。Abelson评判标准的观察指标共四项，在临床中开展较为繁琐，我们把各项观察指标达到2分作为阳性，将各项指标分别与总分值达到5分为阳性的Abelson评判标准进行比较。我们的试验结果表明单纯结膜充血与Abelson评判标准有显著性差异(P=0.000)。结膜充血是速发反应最明显的特征，最为直观，易于观察，但是我们推测结膜充血易于受非特异性刺激的影响，不足以成为判断结膜激发试验的唯一指标。而同样是客观指标的结膜水肿，虽然出现率不高，但不易受非特异性刺激的影响，易于观察，据我们的观察出现球结膜水肿的患者往往病史明确，同时有皮肤点刺试验阳性和血清特异性IgE检测阳性结果，我们把结膜水肿2分定位为结膜激发试验阳性来评估与Abelson评判标准无显著性差异(P=0.065)，吻合度较强(κ=0.714)。我们认为，结膜水肿2分与Abelson评判标准的5分相当。流泪指标受操作刺激、外界干扰较多，也不能替代总分值。而主观指标如痒感，在有的报道中认为痒感是结膜激发试验一项突出的症状，结膜激发试验的评测可以仅由痒感的评测来进行[4]，我们的观察结果却是吻合度中等(κ=0.542)，考虑痒感由患者主观判断，易受受试个体的主观差异影响，难于在各个个体之间进行比较，这可能与研究所用变应原种类、制剂本身、剂量等不同有关，有待于进一步探讨。
综上所述，我们认为：变应原结膜激发试验的不同的评判标准中，Abelson标准评判项目较多，较为繁琐，不利于在临床工作中推广使用，可以用结膜水肿计分替代。
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