摘要 目的研究穿透角膜移植术(PKP)后重组腺相关病毒(rAAV)载体介导的绿色荧光蛋白(GFP)在大鼠植片
中的转染及表达情况。方法 建立32只大鼠穿透角膜移植的动物模型，sD大鼠作为受体，wistar大鼠作为供体，供体植片置于含l0 g／mL(病毒基因组数／mL)rAAV—GFP的DMEM／F12 1：1混合培养液中培养30 min。按照不同的观察时间点用抽签法将角膜移植术后的大鼠随机分成4组，每组8只。手术后隔日在裂隙灯显微镜下观察角膜植片的存活情况。于角膜移植术后1、2、4、12周取各组眼球在共焦显微镜下观察角膜组织中GFP的表达情况，Infinity—capt软件测量角膜植片内皮层中荧光的表达强度。结果 各组中选取的受体角膜植片无水肿、混浊、新生血管及其他并发症发生。GFP基因表达阳性的角膜内皮细胞呈绿色荧光。各组角膜内皮细胞绿色荧光强度与背景亮度比值，A组：91．83±lO．83；B组：128，67±4．32；C组：117．33±3．01；D组：l18．50±3．O2，转染后1周即有明显表达，4周及l2周组较1周组强(P<O．01)，2周组强度最高(P<0．01)。 结论 通过共培养的方法，rAAV—GFP能够有效地转染到角膜内皮细胞中。PKP后GFP基因能够持续、高效、稳定地在移植片的角膜内皮细胞中表达。

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