摘要 目的分别建立携带可溶性血管内皮生长因子受体一1(sFh一1)不同基因片段的慢病毒表达质粒，为进一步研究sFh一1不同基因片段表达的蛋白生物学功能奠定基础。方法 以人新鲜胎盘组织提取的eDNA为模板，进行RT—PCR扩增，制备sFh一1基因片段sFh一1(2—3)和sFh-1(2-4)。扩增片断经限制性内切酶BamHl和SalI双酶切后，插入慢病毒载体pRRL—GFP中，构建慢病毒表达质粒pRRL／sFlt·1(2—3)及pRRL／sFh一1(2—4)，与慢病毒包装载体pMDLg／pRRE、包被载体PRSV／REV、pMD2．G共转染人胚肾细胞(HEK293T)，获得重组慢病毒Lenti．sFh一1(2—3)及Lenti．sFlt一1(2-4)，并感染人视网膜色素上皮(RPE)细胞，通过RT．PCR和Western blotting验证Lenti．sFlt一1(2—3)及Lenti．sFh一1(2．4)在人RPE细胞的表达。 结果 经酶切鉴定及基因测序证实pRRL／sFlt一1(2—3)和pRRL／sFh一1(2—4)的序列与GenBank中的序列完全一致，并且包装成病毒后能有效感染人RPE细胞。结论 本实验成功构建了分别携带sFh—l基因第2—3和第2—4免疫球蛋白样区域编码序列的慢病毒载体，包装成病毒后能有效感染人RPE细胞。

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