万刚辉 许惠卓
中南大学湘雅医院 410008
目的：我们采用高氧诱导的视网膜新生血管模型鼠来研究Netrin-1与视网膜新生血管形成的相关性。
方法：1.建立高氧诱导视网膜新生血管模型。采用随机数字表法将50只新生小鼠分为模型组和正常对照组。参照Smith的方法(出生后第 7 d的小鼠与母鼠一起置于氧浓度为(75±2)%的氧箱中5d，于出生后第12d回到正常环境)诱导视网膜新生血管模型。2.鉴定视网膜新生血管模型出生后第17d的正常组小鼠及模型鼠麻醉开胸，抽取配置荧光造影剂，灌注左心室后，摘除眼球，显微镜下视网膜铺片，荧光显微镜下观察视网膜血管结构。3.免疫组化法检测Netrin-1在视网膜组织中的表达分别于出生后第7天，第13天，第17天，第20天从模型组和正常对照组中各取出5只小鼠处死取眼球，石蜡包埋;切片。以SP法对切片免疫组织化学染色，染色结果判断以视网膜内界膜细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。
结果：1.荧光造影视网膜铺片观察视网膜血管形态正常组视网膜铺片显示视网膜血管分布呈均匀的网状结构。模型组视盘周边见大片无灌注区。无灌注区周围可见大量新生血管，伴荧光渗漏。2.免疫组织化学结果 正常组小鼠各时期，出生第7天模型，出生第13天模型视网膜切片组织内界膜细胞核均未见明显棕黄色颗粒 出生第17天模型，出生第20天模型组视网膜切片组织内界膜细胞核可见明显棕黄色颗粒。
结论：模型鼠视网膜新生血管发生过程中，Netrin-1的表达与视网膜新生管的形成具有明显的相关性。 |
