一常染色体显性遗传视网膜色素变性家系RHO及PFPR31候选基因高发突变位点的排除性定位分析

　　郭海科 覃泳杰 张洪洋 金海鹰 陈艳蕾

　　广东省人民医院 广东省眼病防治研究所 510080

　　目的：探讨一常染色体显性遗传视网膜色素变性(autosomal dominant retinitis pigmentosa，adRP)家系致病基因与常见的RHO、PRPF31基因高发突变位点的关系。

　　方法：选择一连续5代发病的adRP家系，采集该家系中9例正常个体、13例受累个体静脉血3~5mL，提取基因组DNA;筛选2个国内外常见的adRP候选基因(RHO、PRPF31)，对其高发的突变位点设计相应引物，应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)进行扩增，PCR产物经割胶纯化后直接测序;测序结果与GenBank数据库中核酸序列进行Blast分析。

　　结果：22例家系成员中，13例adRP患者均在RHO基因第5外显子347位密码子的第2碱基处出现杂合的点突变(C>T)，该碱基替换使脯氨酸变为亮氨酸(Pro 347Leu)，而9例正常个体中有1例(Ⅲ1)也存在该突变;抽选9例家系成员对PRPF31基因进行初筛，发现8例(5例患者，3例正常个体)存在PRPF31基因第6内含子4个碱基的缺失，正反向测序结果证实为CACA的缺失(IVS6-74delCACA)，仅1例正常个体未发现这种缺失，而在随机选取的2例非家系正常人中也检测出1例存在该位点的缺失;RHO及PRPF31基因其余的高发突变位点未发现任何变异。

　　结论：RHO第5外显子Pro347Leu突变与adRP疾病呈共分离，可能是该家系的致病位点;Ⅲ1为致病基因的携带者，但需进一步检查以排除其隐性发病的可能;IVS6-74delCACA与adRP疾病无直接相关，可能为PRPF31基因上的微卫星位点。