3青光眼的基因治疗效果

    尽管大多数青光眼的遗传基因尚不清楚，但编码眼压降低和/或视神经保护基因的转染和表达可改变相关细胞的生理状态和阻止发病。与其他慢性疾病一样，应用基因治疗青光眼将提供长期有效的治疗效果。

    3.1改善房水循环 目前可用于处理眼前节组织降低眼压的药物必须每天用药，那么顺从性是个主要问题。基因疗法可以减轻这个问题。

    3.1.1减少房水的生成 房水的生成主要靠睫状突非色素上皮逆浓度梯度,将Na + 泵入后房。睫状突非色素上皮细胞紧密连接,形成血－房水屏障,在Na + / K+ATP 酶的作用下,Na + 由细胞主动分泌入后房,这是一个耗能过程,且与HCO3- 和Cl - 协同转运。而通过α2，β2肾上腺素能受体可调节腺苷酸环化酶的活性,继而影响Na + / K+ATP酶的活性[14]。目前许多药物都有抑制与房水生成相关的酶或离子泵的作用,如Na + / K+ATP 酶对乌巴因(ouabain) 敏感,可被其抑制而减少房水的生成;目前应用较多的β2受体阻滞剂,其作用机制就是抑制睫状体上皮的离子泵或酶的活性,引起第二信使的改变从而抑制房水的生成。以上研究结果提示,可以通过影响与房水生成相关的几个步骤减少房水的生成。根据房水的生成原理,目前至少可由以下几个途径通过基因敲除的方法减少房水的生成：⑴基因敲除与房水生成相关的酶或相关的离子通道；⑵基因敲除腺苷酸环化酶减少房水的生成；⑶ 基因敲除G蛋白,减少房水的生成。

    3.1.2疏通房水流出通道增加房水的排出 将外源基因导入小梁网以治疗青光眼， Borras 等[ 15]将外源基因导入小梁网细胞中,基因可表达7d。Budenz 等[16]将含有lacZ 基因的腺病毒载体注入前房和玻璃体内,结果发现小梁网细胞可表达持续14d。使用灌注眼培养系统,Borras 等[ 17] 将管蛋白( tubulin) 基因导入小梁网细胞中,可降低眼压。

    3.2视神经及视网膜神经节细胞的保护性治疗[18] 青光眼性RGCS凋亡的激发因素主要有神经营养因子的剥夺和兴奋性毒素一氧化氮的毒性作用。高眼压或低血流灌注压导致缺血缺氧等，使RGC轴浆流中断，靶源性神经营养因子供应中断，同时兴奋性毒素大量产生，激活诱导凋亡的基因作用于细胞表面受体，启动RGC凋亡程序。已有研究表明重复眼内注射神经营养因子能暂时性拯救因轴突损伤导致的RGC死亡。采用基因疗法转染这些营养因子，能克服重复注射带来的并发症。

    脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF) 是一种重要的RGC存活因子。Di Polo等[19]通过玻璃体腔内BDNF表达的腺病毒载体能暂时性延缓视神经横断性损伤后RGC死亡。但是基于腺病毒载体的转基因表达有效时间相对较短，而且其本身易引起炎症反应。腺相关病毒(AAV) 载体能够在视网膜进行长期的转基因表达，引起的眼部炎症反应很轻微。Martin等[20]通过采用532nm二极管激光处理大鼠小梁网引起中等程度的慢性眼压升高，只导致特异性的RGC丧失，而不损害其他视网膜层。他们采用独创的AAV-BDNF结合土拨鼠肝炎逆转录调节元素(woodchuck hepatitis post-transcriptional regulatory element, WPRE),单次玻璃体腔内病毒注射2wk内就很容易在大鼠RGC层神经元产生很高的转染效率。结果表明实验性青光眼4wk后，玻璃体腔内注射AAV-BDNF-WPRE与单纯注射生理盐水或不含BDNF的对照病毒相比，能明显增加RGC的存活率(轴突计数) ，进一步支持神经营养疗法可作为青光眼降低眼压的补充治疗的潜在可行性。

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