1 材料与方法
1.1 材料 日本大耳白兔12只(锦州医学院实验动物中心提供),小牛血清去蛋白注射液(锦州奥鸿药业有限责任公司生产),爱维(即:医用透明质酸钠凝胶,山东博士伦福瑞达制药公司生产),BSS(平衡盐灌注液,日本参天制药株式会社生产),茜素红(天津市大茂化学试剂厂生产),锥蓝(天津市光复精细化工研究所生产)。白内障超声乳化系统(sovereign),接触型角膜内皮反射显微照相系统(EM-1020),光学显微镜(Olympus)。
1.2 方法
1.2.1 动物分组 将12只日本大耳白兔右眼设定为实验组,左眼为对照组。
1.2.2 动物模型的制作 使用美国sovereign超声乳化系统,常规显微手术器械,灌注液为平衡盐溶液及含100 μg/ml DECB的平衡盐溶液;设置恒定参数:乳化功率40%,负压33.25 kPa,(1 mm Hg=0.133 kPa),瓶高170 mm,乳化时间100 s。手术前,所有日本大耳白兔均用复方托吡卡胺滴眼液散瞳,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,用盐酸奥布卡因点双眼表面麻醉角膜。用兔头固定器固定好,生理盐水冲洗手术眼,于上方角巩膜缘做切口,穿刺入前房,注入黏弹剂;扩大切口至3 mm超声乳化头置于中央区乳化吸出晶体核及皮质;手术结束后1 min自角膜缘处吸出0.1 ml房水,随后实验组将含有100 μg/ml DECB液的平衡盐0.1 ml注入前房;对照组将0.1 ml平衡盐注入前房。术后妥布霉素地塞米松滴眼液点双眼,2 h 1次。
1.2.3 术后观察和检测方法 术后观察和检测方法有:(1)角膜内皮定量检测:被测兔角膜点盐酸奥布卡因后,应用日本Topcon公司生产的EM-1020型接触型角膜内皮反射显微照相系统对角膜中央区0.25 mm×0.37 mm范围进行照相,行角膜内皮细胞形态学定量测定;然后进行计数分析,观察时间为术前和术后即刻、术后6 h、1天、2天、3天、7天。测量指标为平均细胞面积(average size)、细胞变异系数(coefficient of variability)、细胞密度(cell density)。(2)角膜内皮形态观察:术后即刻、术后24 h、术后3天,分别处死4只兔,锥蓝-茜素红联合染色后观察内皮形态改变。
1.3 统计学方法 采用SPSS11.5统计软件分析,组间比较采用独立样本的t检验,组内比较采用单因素方差分析q检验。
2 结果
2.1 角膜内皮定量观察 术前、术后即刻、术后6 h、1天、2天、3天、7天进行角膜内皮细胞定量分析。实验组和对照组在各个时间点进行比较,使用SPSS 11.5统计软件分析细胞平均面积,组间比较采用独立样本的t检验,结果表明:术后6 h、1天、2天、3天同时间比较,差异有显著性(P<0.05);实验组术后2天和对照组术后7天差异无统计学意义(P>0.05)。组内比较采用单因素方差分析q检验,实验组术后3天与术前差异无统计学意义(P>0.05),而对照组术后7天方能修复到和术前差异无统计学意义(P>0.05)。
变异系数组间比较采用独立样本的t检验,结果表明:术后6 h、1天、2天、3天同时间比较差异有统计学意义(P<0.05);实验组术后3天和对照组术后7天差异无统计学意义(P>0.05)。组内比较采用单因素方差分析q检验,实验组术后3天和术前差异无统计学意义(P>0.05),而对照组术前和术后各个时间点差异均有统计学意义(P<0.05)。
细胞组间比较采用独立样本的t检验结果表明,术后6 h、1天、2天、3天同时间比较,差异有统计学意义(P<0.05);实验组术后3天和对照组术后7天差异无统计学意义(P>0.05)。组内比较采用单因素方差分析q检验,实验组术后3天和术前差异无统计学意义(P>0.05),对照组术后7天和术前差异有统计学意义(P<0.05)。其比较结果。
整个修复过程中实验组的内皮细胞面积小于对照组,变异系数小于对照组,内皮细胞密度大于对照组。显而易见,实验组的内皮细胞修复好于对照组,说明DECB可以促进内皮细胞的修复。
上一页 [1] [2] [3] 下一页 |