2 Fas/FasL介导细胞凋亡诱导免疫耐受

    角膜能成为免疫赦免器官，Fas/FasL介导的细胞凋亡在其中发挥重要的作用。最初，我们多是在CTL细胞的非分泌型杀伤机制中认识到Fas/FasL：FasL表达在Ｔ细胞表面，Fas表达在靶细胞表面，二者结合后诱导靶细胞分子胞内段启动致死信号，使靶细胞在基因控制下发生主动性程序性死亡（细胞凋亡）。但是在机体中，还有这样一部分活化的T细胞，其表面表达Fas，而角膜内皮和上皮细胞表面表达FasL（眼前房内还可检测到sFasL），使进入角膜内的活化的T细胞凋亡,而角膜细胞本身免于杀伤。在角膜移植术后，角膜内皮和上皮细胞表面的FasL表达无下调[16]、房水中sFasL的含量增加（尤其在角膜排斥反应来临之前增加更明显）[17]，这些均有助于角膜成为免疫豁免区。

    利用Fas/FasL介导细胞凋亡这一机制，可通过诱导移植物高表达FasL形成免疫耐受而延长移植物的存活期。动物实验已证实，通过腺病毒载体将FasL cDNA基因转导入鼠的肾脏、胰岛、角膜移植物中，使其表达FasL，可保护移植物不被受体免疫系统排斥，延长其存活时间。但研究中也发现,当FasL过度表达于供体角膜表面时，可导致供体角膜内大量多形核白细胞浸润，反而加速了移植的失败[18],这可能还与表达Fas的角膜细胞自身相互作用并发生破坏有关。故对Fas/FasL通路调控凋亡的应用还需进一步研究。

    3克隆清除或使T细胞衰竭诱导免疫耐受

    3.1克隆清除 可分为中央型清除和周围型清除。角膜移植免疫耐受中很少使用中央型清除（胸腺清除），多为周围型清除，即在移植期间使用全T细胞免疫毒素或其它清除抗体（如抗CD3、抗CD4、抗CD8单克隆抗体）清除循环中的成熟T细胞，在移植物植入时淋巴细胞活化、增殖最强烈的时候阻止免疫反应，使移植物和免疫系统在移植后更为静止的时期“相遇”，导致免疫应答的转化，结合其它克隆失活机制进入免疫耐受,Pindjakova等[19]在鼠异种角膜移植模型中，使用抗CD4单抗处理受体，结果减少了细胞因子IL-2，IL-4，IL-10的产生，显著延长了移植物的存活。

    3.2诱导T细胞衰竭 过强的免疫应答可使特异识别该抗原的淋巴细胞库枯竭。超抗原即可引起这种现象，其在极低浓度即可比普通抗原高数十倍至数千倍的过度刺激T细胞，活化的T细胞大量被清除，导致T细胞功能和数量失调，继发免疫抑制状态。超抗原还能抑制CD4+CD25+调节T细胞的活性、抑制效应T细胞的增殖，但具体机制不清[20]。接英等[21]在大鼠高危角膜移植模型中，术前给予受体大鼠腹腔内注射超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B亚单位（SEB），结果角膜植片及外周免疫器官中的CD4+和CD8+T细胞数目均明显减少、促进细胞增殖的IL-2因子减少而抑制性细胞因子IL-10增加，受体淋巴细胞免疫耐受形成，角膜植片存活时间明显延长。

    4诱导受体产生免疫偏离

    CD4+Ｔ细胞根据其分泌细胞因子的不同可分为Th1和Th2两类亚群。Th1细胞分泌IL-2，TNF，IFN-γ，介导细胞免疫；Th2细胞分泌IL-4，5，6，10，13，辅助B细胞增殖及抗体生成。正常状态下,Th1和Th2细胞功能处于动态平衡之中。在同种异体移植时,Th1启动迟发型超敏反应,是角膜植片中主要的浸润细胞[22]；Th2通过分泌的细胞因子抑制Th1活性,而促使免疫耐受的形成[23]。因此促进宿主Th1型应答向Th2型应答转换是诱导移植耐受的另一策略，有报道，APC内的巯基氧化还原剂具有调节Th1/Th2平衡的作用，Yamada等[24]向受体鼠腹腔内注射药物诱导巨噬细胞内产生谷胱甘肽，延长了角膜植片的存活时间，其可能机制为巨噬细胞内的谷胱甘肽抑制了Th1的免疫应答。Sonoda等[25]先预先将供体鼠C57BL/6的角膜组织植入受体BALB/c鼠的前房内，然后再行角膜移植手术，结果角膜植片的存活期延长，这是因为植入受体前房内的供体组织诱导了受体前房相关免疫偏离（ACAID）。诱导移植耐受还可以通过阻断Th1细胞分泌的细胞因子或增强Th2细胞分泌的细胞因子的效应来实现。IL-10是巨噬细胞的强抑制剂,并可抑制Thｌ型淋巴因子的产生,成为这一策略的首选细胞因子。EBV编码的病毒IL-10(ＶIL-10)与人和鼠的IL-10有高度同源性,具有人和鼠IL-10的多种相同的生理功能。用编码ｖIL-10的逆转录病毒转入移植心脏,可延长同种心脏移植的存活期达44 d,且表现出一定的剂量依赖关系[26]。Klebe等[27]在羊角膜移植模型中，体外转染编码IL-10的基因给供体角膜，也成功诱导了免疫耐受，延长了移植物的存活。

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