2.2 NF-κB与青光眼视网膜损害的关系  青光眼早期，视网膜神经纤维层便可出现局限性萎缩。青光眼导致视功能损害的病理基础主要是视网膜神经节细胞的凋亡和神经纤维的丧失。多项研究表明，细胞抗凋亡作用的启动信号仍然是各种生存因子通过受体激酶的介导，激发以NF-κB为中心的正向级联放大的信号转导通路,促使NF-κB调控的抗凋亡基因包括IAP、 bcl-2家族成员等的激活及JNκ、Bax 、Caspase-9等凋亡相关基因的下调。Choi等[17]为了探索NF-κB在视网膜神经节细胞死亡过程中的作用，他们将成年小鼠视神经从距眼球5 mm处截断，分别用光学和电子显微镜观察视网膜神经节细胞形态改变，并用免疫组化法测定NF-κB活化情况。结果发现活化的NF-κB（p50和p65）随时间推移而显著增加，视网膜神经节细胞也相应出现核固缩等凋亡表现，因此推断出NF-κB与视网膜神经节细胞凋亡可能有密切关系，但NF-κB对神经节细胞的凋亡是起介导作用还是代偿作用仍不清楚。他们在继续研究中用溴化乙锭和NF-κB抗体对小鼠视网膜神经节细胞行双着色实验，以确立NF-κB的活化与视网膜神经节细胞死亡的相关性[18]。结果显示NF-κB只出现在存活的神经节细胞中，且在视神经截断3d后其活化转移入细胞核中。同时他们应用NF-κB抑制剂柳氮磺胺吡啶阻断NF-κB的活化以观察神经节细胞数量的相应变化，发现应用后存活的神经节细胞数量明显减少。国内也有学者[19-22]通过免疫组化技术对大鼠视网膜缺血再灌注损伤中NF-κB的表达及bFGF（碱性成纤维细胞因子）对NF-κB表达的影响进行研究，发现大鼠视网膜缺血再灌注后的损伤可导致神经元的凋亡，凋亡细胞随时间变化的规律和NF-κB表达随时间变化的规律相同，且bFGF应用后NF-κB的活化明显增加。Fuchs等[23]在有氧和缺血的环境中分别培养纯净的和混杂有其他视网膜细胞的视网膜神经节细胞以观察TNF-α对其生长的影响，发现混合培养基中神经节细胞对TNF-α不敏感，它们生长良好。而纯净的神经节细胞在TNF-α的作用下出现凋亡。究其原因发现混合培养基中其他视网膜细胞能够释放某些分子以促进神经节细胞中NF-κB的激活，因而阻止了TNF-α诱导的视网膜神经节细胞的凋亡。取出生后10d的SD大鼠眼球分别行视网膜神经节细胞和神经胶质细胞的原代培养，以观察TNF-α对二者的作用及其分子机制。同Fuchs的实验结果相符，神经节细胞在TNF-α诱导下发生凋亡，而神经胶质细胞存活。通过作cDNA序列分析、RT-PCR和免疫组化分析，他们发现神经节细胞和神经胶质细胞内均有NF-κB激活的迹象，但神经节细胞中没有足量的 NF-κB P65的磷酸化，因而由其介导的核转录活动处于静止状态，NF-κB为中心的信号转导通路在神经节细胞中未被激活，TNF-α诱导神经节细胞出现凋亡。Ando等[25]在血清丰富的RPNV640培养基中培养出PC12细胞（神经元分化细胞株），然后去除血清诱发PC12细胞凋亡，通过分别往其中加入不同剂量Nipradilol(尼普地洛)进行观察。此药能在去除血清2h后使NF-κB激活，细胞生存能力明显增强，12h后下调与凋亡相关的Bax基因表达，24h后下调Caspase-9和Smac/DIABLO基因表达，从而能抗细胞凋亡，对细胞有保护作用。可见激活的NF-κB可能具有保护视网膜神经节细胞的功能，它在抗神经节细胞凋亡方面可能起到了积极的作用。

    2.3 NF-κB与青光眼视乳头损害的关系  青光眼患者的视乳头病变最早发生于视乳头筛板区，随之细胞外间质、结缔组织及星状胶质细胞病变明显，视神经节轴突周围局部细胞病理反应可能对其神经病变起重要作用[26]。随着对一氧化氮（NO）生理及病理作用机制的研究发现，过量的NO具有细胞毒性作用，能导致神经细胞变性[27]。诱导型一氧化氮又称二型一氧化氮（NOS-2），在生理状态下不表达，但被多种因素如细胞因子或内毒素等诱导后可导致大量NO产生，对邻近细胞产生毒性作用。Neufeld等[28]通过实验对NOS-2进行研究，发现其大量存在于青光眼患者的视乳头中，且NOS-2抑制类药可显著抑制青光眼患者神经节细胞死亡 [29]。后来他们[30]用免疫组化双荧光标记法对15只中、重度开角型青光眼患者视乳头标本的NOS-2进行标记，发现NOS-2主要位于视乳头的星状胶质细胞内且NOS-2阳性的星状胶质细胞多位于神经组织结构紊乱区，特别是神经纤维损害区，提示青光眼视乳头病变中，表达NOS-2的星状胶质细胞可能对神经节细胞的轴突损害起重要作用。但视乳头内星状胶质细胞表达NOS-2的调控机制并未被证实。他们继续研究发现在细胞激酶（干扰素γ/IL-1β）或高静水压刺激下，人类视神经星状胶质细胞能在体外产生NOS-2[31]。为了弄清是否有不同的信号转导机制参与到视神经星状胶质细胞的这种反应，他们分别用NF-κB抑制剂SN50和CAGE，P38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB202190和SB203580来阻断相应的信号转导通路。分析数据后他们发现无论是细胞激酶还是高静水压的刺激，只要应用了NF-κB抑制剂，视神经细胞均不能产生NOS-2，而P38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂只能阻断细胞激酶诱导的NOS-2合成。由此可推测，青光眼病变过程中的高眼压可能导致视乳头星状胶质细胞NOS-2的表达，视神经星状细胞可能通过NF-κB的激活控制NOS-2基因的转录而促进NOS-2的合成。至于NF-κB具体调控NOS-2合成的机制有待进一步研究。

    由以上的研究资料可以看出，核转录因子NF-κB在青光眼发生发展过程中起着重要作用。但无论是对小梁网等前部眼组织还是视网膜等眼后部组织，它所扮演的角色及其具体作用机制并未完全清楚。相信随着分子生物学和其他相关学科的发展，NF-κB与青光眼的关系将进一步明确，必将为青光眼的诊断和治疗提供新的途径。

上一页  [1] [2] [3] [4] 下一页