结果

　　一、角膜缘干细胞生长情况

　　组织块接种后细胞很快呈膜状扩展生长，约术后第10天时达到生长高峰，细胞大小一致，呈多角形，具有角膜上皮细胞的典型形态特征。将含有角膜缘干细胞的细胞悬液接种于有羊膜的塑料培养皿中24 h，可见细胞大部分贴壁，术后第3天后细胞融合为单层，术后第7天组织学染色可见羊膜上细胞密集，部分显示为多层细胞结构(图1)。 

图1　接种后第7天角膜缘干细胞呈膜状扩展生长，细胞大小一致，为多角形　Ciemsa染色×200

　　二、角膜缘碱烧伤动物模型情况 

　　碱烧伤后第3天兔角膜缘缺损大部分修复，荧光素染色仅见点染,1周后角膜缘可见新生血管逐渐长入；2周时新生血管进入角膜近中央区；4周后，全角膜可见新生血管，且基质有明显浸润，部分上皮细胞剥脱伴结膜上皮化。 

    三、干细胞羊膜治疗的情况 

　　羊膜干细胞移植术后第7天，拆除睑缘缝线，可见角膜表面平整，荧光素染色部分点染，仍可见充盈的新生血管，结膜充血(++)；术后2周角膜新生血管明显减少；4周时角膜无结膜上皮进入，可见新生血管已退至角膜缘。病理学检查证实，角膜缘可见多层上皮细胞形成，基质浸润减轻，新生血管减少，羊膜下组织中可见少量炎性细胞浸润.单纯羊膜移植治疗的兔角膜结膜上皮覆盖角膜缘，对照组中角膜仍然为新生血管.3组角膜病变评分见图9～12，可见干细胞移植治疗组的角膜新生血管和上皮修复与对照组间比较差异有显著性 (t值分别为16.50和11.73，P＝0.000)，3组术后角膜病变总评分均值分别为：对照组9.67±1.20、羊膜组8.02±1.16、干细胞羊膜组6.37±1.37，干细胞移植组与对照组和羊膜治疗组比较差异显著，(t值分别为21.34和15.39，P=0.000)，表明干细胞移植可以显著减轻角膜病变；羊膜组与对照组比较差异有显著性(t=8.33，P=0.000)，主要为上皮光滑和新生血管减少。

图2  治疗后第35天兔角膜缘可见多层上皮细胞，羊膜下可见炎性细胞浸润HE×100

上一页  [1] [2] [3] 下一页