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PVR玻璃体切割物的免疫组化研究

http://www.cnophol.com 2008-8-12 14:15:29 中华眼科在线

   【摘要】 目的 观察外伤性PVR玻璃体切割物的特点,探讨外伤性PVR的发生机制。方法 观察玻切物标本的细胞构成并检测bFGF和巨噬细胞。结果 PVR标本中以RPE为主要增殖细胞,神经胶质细胞在外伤性PVR玻璃体切割物中更多见。PVR组与外伤PVR组的bFGF和CD68阳性率不同。结论 外伤性PVR也是一种细胞增殖性疾病,玻璃体内细胞增殖与生长因子水平密切相关,是外伤性PVR形成与发展的重要机制之一。

    关键词 增殖性玻璃体视网膜病变 玻璃体切割物 免疫组化

  Immunohistochemical study on vitrectomy specimens of  proliferative vitreoretionpathy
  Sun Yongmei,Fu Guangming,Zhang Lina,et al.
 
    Department of Ophthalmology,the First Peoples Hospital of Tongliao City,Inner Mongolia028000.
  【Abstract】 Objective To investigative the relationships between the PVR and the growth factor.Methods Thirty-two membrane sample were studied by using S-P technique.Results In20specimens from PVR eyes,positive staining was found in16for CD68,18for bFGF.In18specimens from eyes with traumatic PVR,postive stainingwas notˉed in13for CD68,10for bFGF.Conclusion Retinal pigment epithial cells and glial cells are the major cell types in the proliferative membranes of PVR and traunmatic PVR.bFGF and CD68play an important role in the development courses of PVR and traunmatic PVR.
  Key words proliferative vitreoretionpathy vitrectomy specimens immunohistochemical staining 

  眼外伤后可因眼内纤维组织增生引起牵拉性视网膜脱离,与增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)有相似的临床特征,我们将其称为外伤性PVR。为探讨外伤性PVR的发病机制,我们对38例PVR和外伤性PVR患者的玻切物进行了免疫组化研究,现报告如下。

  1 资料与方法

  1.1 一般资料 选择诊断为PVR并行玻璃体切除术的患者38例,男28例,女10例。平均年龄(32.1±12.6)岁。病程1 月~2年。其中PVR组20例(20眼);外伤性PVR组18例(18眼)。根据1983年国际视网膜学会命名委员会的4级分类法分类 [1]  。对照组:采用慢性扁桃体炎摘除标本作为CD68的阳性对照。用已知能分泌bFGF人眼视网膜脉络膜组织作为bFGF的阳性对照 [2]  。取自意外伤害眼球摘出标本。同时设不加一抗和不加二抗的阴性对照。

    1.2 玻璃体切割物的收集 术毕即收集玻切液,常温下离心10min,1500r/min,弃上清液后再离心5min,800r/min,弃上清液,-20℃保存备用。

    1.3 主要设备及试剂 Storz公司Premiere玻切机;S-P试剂盒,UltrasensitiveTM S-P Kit,MS-397,CD68的单克隆抗体(即用型)。以上试剂均购于福州迈新生物技术开发公司。

    1.4 实验方法 标本常温下融冻,固定、脱水、透明、浸蜡、包埋,连续切片5μm厚,每个标本切取6片以上,各取2片分别行常规的HE染色及2种鼠抗人单抗免疫组化S-P法染色。bFGF的浓度是1:200,CD68为即用型。

    1.5 结果判定标准及统计学分析 观察染色片中的细胞成分、数量、形态。比较PVR和外伤病PVR玻切物构成的异同。免疫组化染色结果的评估方法为:计算每片抗体所染阳性细胞数[3]  。每片选择3个视野,每个视野计数100个细胞,阳性染色为1~30个为弱阳性,31~60个为中度阳性,61个以上为强阳性。以细胞浆中出现棕黄色颗粒为CD68阳性,反之为阴性;以细胞膜和部分胞浆中出现棕黄色颗粒为bFGF阳性,反之为阴性。结果用χ 2 检验进行统计学处理。

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(来源:中华现代眼耳鼻喉科杂志)(责编:duzhanhui)

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