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视网膜母细胞瘤c-myc基因产物表达及其临床意义

http://www.cnophol.com 2008-11-6 14:36:49 中华眼科在线

中华眼科杂志 1999年第5期第35卷 论著摘要

作者:夏翠然 袁乃芬 刘江惠 王晓玲

单位:(夏翠然、袁乃芬) 050011 石家庄,河北医科大学第四附属医院眼科;(王晓玲) 病理科;刘江惠) 河北省肿瘤研究所

  c-myc基因是人类与肿瘤有密切关系的癌基因,在胃癌、肺癌、乳腺癌及白血病等肿瘤中均有显著表达[1,2]。为探讨c-myc基因与视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)的关系,我们采用流式细胞技术及免疫荧光染色技术,对Rb组织中c-myc基因蛋白产物表达进行定量检测,并结合病理,对肿瘤浸润能力和肿瘤细胞增生能力进行分析,现报告如下。

  一、材料与方法

  1.材料来源:取本院病理科存档的石蜡组织标本31例,其中28例经病理证实为Rb,男13例,女15例;年龄6个月至6岁。正常眼外伤视网膜组织标本3例作对照。

  2.病理学检查:经病理证实为Rb的28例中,肿瘤分化程度分为R0(组织中无菊形团)者15例,R1(仅有少量菊形团,每高倍镜少于5个)者11例,R2型(多数瘤细胞呈菊形团)者2例。分化程度依次由R0、R1至R2。肿瘤累及视神经者9例,未累及者19例。

  3.流式细胞检测:(1)单细胞样品制备方法参见文献[2]。(2)采用间接免疫荧光标记法:一抗为c-myc单克隆抗体(美国Dako公司生产品),二抗为FITC-IgG单抗工作液(美国Dako公司生产品)。正常视网膜组织作对照,同时设阴性及阳性对照。(3)采用美国FACS420型流式细胞仪,测定前以鸡血红细胞作为标准样品,调整仪器的变异系数在5%以下。

  4.数据分析:

  (1)荧光指数(fluorescence index,FI):表示c-myc基因产物的相对含量。公式:

  当FI=1.00±0.05时为阴性表达,大于此值为阳性表达。

  (2)肿瘤细胞增殖指数(proliferative index,PI):表示肿瘤细胞增殖能力。公式:

  GO/G1期:DNA合成前期;S期:DNA合成期;G2M期:DNA合成后期和分裂期。

  (3)本文数据采用χ2及配对t检验。

  二、结果

  1.c-myc基因产物表达水平:正常视网膜组织c-myc基因产物表达(FI)为0.90~1.02,平均为1.00±0.02;Rb组织中c-myc基因产物表达(FI)为1.20~1.71,平均为1.45±0.15。

  2.Rb c-myc基因产物表达与细胞分裂增殖指数的关系:按FI平均值为1.50将28例Rb组织分为两组:FI>1.50组12例,其中PI值>30者9例,PI值<30者3例;FI<1.50组16例,其中PI值>30者5例,PI值<30者11例。两组间比较,差异有显著性(χ2=5.25,P<0.01)。若以28例Rb组织PI值平均数30为界又可将其分为两组:PI值>30组,FI值为1.51±0.15;PI值<30组,FI值为1.34±0.14,两组间比较差异有显著性(t=3.56,P<0.01)。说明Rb组织c-myc基因产物表达高者增殖能力强。

  3.Rb c-myc基因产物表达与组织分化程度的关系:15例R0型Rb c-myc基因产物平均表达量为1.54±0.17,11例R1型为1.37±0.12,2例R2型为1.39±0.13,R0与R1、R2比较,差异有显著性(t=2.28,P<0.05)(因R2例数少,R2及R1一并与R0比较)。

  4.Rb c-myc基因产物表达与患病年龄的关系:患病年龄<3岁的FI值为1.50±0.14,>3岁的FI值为1.36±0.13,两者间比较,差异有显著性(t=2.68,P<0.05)。

  5.Rb c-myc基因产物表达与视神经受累的关系:9例肿瘤累及视神经组FI为1.46±0.25,19例未累及视神经组FI值为1.38±0.37,视神经受累组FI值高于未累及组,其两组间比较,差异无显著性(P>0.05)。

  三、讨论

  c-myc基因是myc 基因家族的一员, 定位于人类染色体8q24,其基因产物是与细胞增殖有关的核蛋白,对细胞的生长和分化起主要作用。在细胞静止期,c-myc基因产物几乎不表达,但在有丝分裂原刺激下可迅速表达,使细胞由G0或G1期进入S期,增加细胞众数,这些异常改变在形成、维持和促进肿瘤细胞的生长分化过程中具有重要作用[3,4]

  Kreipe等[1]研究发现,乳腺癌细胞的增殖能力与c-myc基因扩增有关。Brodeur等报道,c-myc基因在高度转移的肿瘤中可扩增300倍,而在低转移肿瘤中未见其扩增[3]。本研究发现,Rb c-myc基因产物表达阳性率为100%,而表达量与细胞分裂增殖指数呈正相关,与组织分化程度呈负相关;并且肿瘤累及视神经组c-myc的FI值高于未累及组(由于样本数小,统计无显著性差异),提示c-myc基因产物高表达者,其恶性程度高,预后差。另外,c-myc基因产物表达量与患病年龄有密切关系,患病年龄越小,c-myc的FI值越高,提示患病年龄与Rb恶性度有关。

  本课题受河北省科委科研基金资助(基金编号982761950)

  参考文献

  1 Kreipe H , Feist H , Fischer L , et al .Amplification of c-myc but not of c-erb-2 is associated with high proliferative capacity in breast cancer.Cancer Res,1993,53:1956-1961.

  2 左连富.流式细胞术与生物医学.沈阳:科学技术出版社,1996.73-77,264.

  3 白 成.myc癌基因.国外医学肿瘤学分册,1987,14:84-89.

  4 Spencer CA , Groudine M . Control of c-myc regulation in normal and neoplastic cell . Adv Cancer Res,1991,56:1-48.

(收稿日期:1998-04-08  修稿日期:1999-03-25)

(来源:互联网)(责编:duzhanhui)

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