孟繁剑 广州市红十字会医院 陈家祺 中山大学中山眼科中心
目的:检测经诱导分化后的类结膜上皮细胞中β-2-microglobulin、keratin13基因的表达及人工结膜组织中特异性蛋白(CK13、MUC5A/C)的表达情况。
方法:试验组细胞以结膜上皮细胞为饲养细胞进行共培养,并设立空白对照组细胞培养相同时间,分别于地1、3、5、7日取各组细胞提取RNA进行实时RT-PCR定量检测各组β-2-microglobulin、keratin13基因的表达情况;并用免疫印记的方法检测人工结膜组织膜中是否有结膜特异性蛋白CK13及MUC5A/C的表达。
结果:试验组细胞共培养3天后出现β-2-microglobulin、keratin13基因的表达,5、7天的表达量显著提高;经体外构建10天、20天的人工结膜都有与正常结膜组织相同的特异性蛋白CK13及MUC5A/C的表达。
结论:经本试验方法构建的人工结膜组织膜具有与正常结膜组织高度相似的分子学特性,因此可作为结膜组织的替代材料进行眼表重建的临床治疗。
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