侯旭 惠延年 韩泉洪 胡丹 张晓光 郭长梅 王海燕

第四军医大学西京医院眼科 全军眼科研究所 陕西省西安市 710032

目的 视网膜色素上皮细胞（RPEs）在视网膜裂孔形成和脱离的发生过程中会受到牵拉。在以前的研究中，我们发现机械牵拉可以改变人RPE细胞骨架的结构，可以促进单核细胞趋化蛋白－1（MCP-1）和白介素 －8（IL-8）的表达，说明牵拉可能协助细胞的增生和移行。已知牵拉可以活化细胞外信号转导通路和基质金属蛋白酶（MMP）的表达，从而改变细胞外基质。在本研究中，我们观察牵拉是否改变RPE中MMP、金属蛋白酶抑制剂（TIMP）和纤维粘连蛋白（FN）的表达，以及丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的变化。

方法 胶原包被的磁珠与附壁生长的RPE细胞结合后置于衡定磁场中。WESTERN方法观察MAPK在30分钟内的表达变化。在15、30分钟、1、4、12小时的时间点，分别用RT-PCR方法观察MMP、TIMP和FN的核酸表达，明胶酶谱方法观察MMP的活化，以及酶联免疫吸附（ELISA）方法观察MMP-2的蛋白分泌。

结果 在牵拉过程中，总ERK、JNK和p38未见变化，活化型ERK未见变化，活化型JNK未见表达，而活化型P38在5分钟后表达显著增高(P<0.01)。FN的核酸在15分钟时增加2.4倍，MMP-2的核酸在4小时增加2.1倍，TIMP未见变化。MMP-2的分泌在4小时增加1.5倍，12 小时增加1.9倍。

结论 牵拉能够上调RPE细胞MMP-2和FN的表达，从而改变MMP和TIMP的平衡，且可能部分通过P38通路。牵拉可能改变视网膜神经上皮层和色素上皮层间的细胞外基质代谢，减弱粘连，从而可能在视网膜脱离发生中起部分作用。