王艳华 王一 吴楠
第三军医大学全军眼科中心 重庆 400038
目的 通过用髓鞘抑制物包被培养板模拟在体情况下视神经损伤后的抑制性微环境,并进行视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)培养,研究α晶体蛋白是否能拮抗髓鞘抑制物的抑制作用而促进 RGCs轴突生长,为进一步研究α晶体蛋白促进视神经再生的机制奠定基础。
方法 1、从大鼠晶状体提取纯化α晶体蛋白,并用肽指纹质谱法鉴定其纯度。从大鼠脑组织中提取髓鞘抑制物并鉴定其成份和抑制RGCs突起生长的功能。2、在髓鞘抑制物包被的培养板上进行RGCs离体培养,扫描电镜观察α晶体蛋白组与对照组(牛血清白蛋白组)生长锥萎缩情况,并分析比较培养1、3、5d,两组有突起的细胞数及最长突起长度的统计学差异。
结果 1、提取的α晶体蛋白纯度高,髓鞘抑制物质中含有NogoA和MAG,并具有抑制RGCs 突起生长的功能。2、RGCs离体培养显示,培养1、2、3、5d,α晶体蛋白组有突起的细胞数及最长突起长度均较对照组显著增多增长(P<0.01),生长锥萎缩情况α晶体蛋白组也明显好于对照组。
结论 α晶体蛋白能拮抗髓鞘抑制物的抑制作用促进RGCs轴突生长。
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