胡维琨  张虹  李贵刚  项楠

华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科430030

目的：观察氯离子通道-3(ClC-3)反义寡核苷酸(AS-ODN)在内皮素-1(ET-1)对体外培养牛角膜内皮细胞(BCECs)增殖中的作用。

方法：实验设计采用完全随机设计，采用方差分析检验。不同浓度的ClC-3 AS-ODN加入BCECs细胞作用24h后加入200pM ET-1，继续培养48h。RT-PCR、Western blot检测ClC-3 mRNA和蛋白的表达。流式细胞仪和MTT法检测细胞周期和增殖。

结果：ClC-3 mRNA及其蛋白的表达呈平行关系。与对照组相比，ClC-3 AS-ODN浓度依赖性地减少BCECs ClC-3 mRNA和蛋白的表达。同时ClC-3 AS-ODN浓度依赖性地降低BCECs MTT吸光度值和细胞存活率。经100μg/ml ClC-3 AS-ODN处理后，细胞G0/G1期细胞比例明显增高，S期及G2期细胞比例则明显降低，出现明显的凋亡峰，增殖指数明显下降。

结论：ClC-3 AS-ODN可能通过减少ClC-3 mRNA和蛋白的表达，浓度依赖性抑制ET-1对培养BCECs增殖作用，并使细胞周期停滞在G1期。提示氯离子通道在角膜内皮细胞的增殖中发挥一定作用。

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