陈松 钱江源 李文博 马修彬
天津市眼科医院300020
目的:观察固定波长和强度的蓝光对培养人眼视网膜色素上皮(RPE)细胞中复制衰老相关的-半乳糖苷酶活性的作用,及不同浓度VitE的对复制衰老的抑制作用,为研究老年性黄斑变性(AMD)发病机智提供依据。 方法:1.建立蓝光诱导的人RPE细胞复制衰老模型 以因意外死亡的新鲜人眼球为材料进行RPE细胞的原代培养,以免疫组织化学方法进行细胞鉴定。2.VitE和蓝光的作用 在培养的人RPE细胞中,自第三代开始在培养液中加入VitE,并按照浓度不同分为10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L分组,以光照不给药和无光照不给药为对照组,给予波长450nm ~ 500nm、细胞表面水平光照度为(2000±500)lx的蓝光进行光照,并进行标准化的β一半乳糖苷酶活性和细胞增殖能力检测。
结果:培养人RPE细胞中光照组中β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数量随传代次数的增加而增加,细胞增殖能力降低,随VitE的浓度升高β-半乳糖苷酶活性阳性细胞数量降低,细胞增殖能力降低程度相小于对照组。
结论:蓝光能诱导培养人RPE细胞发生复制衰老,复制衰老的发生与细胞传代次数相关,抗氧化剂VitE能抑制复制衰老的发生,其相关研究可能对了解AMD的发病机制有帮助。
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