白内障             942                                      PO0022

    RNA干扰Foxe3对人永生化晶状体上皮细胞增殖的影响

    黄钰森  谢立信

    山东省眼科研究所 266071

    目的： 研究靶向Foxe3基因的siRNA对Foxe3基因的特异性下调作用及其对晶状体上皮细胞增殖的影响。

    方法： 采用小分子RNA干扰(RNAi)技术，以阳离子脂质体为载体，将针对人Foxe3基因生物合成的发夹状短链RNA(Foxe3－shRNA)转染人永生化晶状体上皮细胞（HLEC-B3），抑制Foxe3的表达；采用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)、荧光定量PCR（Real-time PCR）和Western blot免疫荧光检验shRNA干扰Foxe3表达的效果；应用四甲基偶氮唑盐(MTT)和细胞生长曲线法检测细胞的生长状况；采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。

    结果： RNAi技术可有效封闭HLEC-B3细胞中Foxe3 mRNA和蛋白的表达；细胞增殖明显受到抑制，细胞周期被阻滞于G0/G1期，并可诱导细胞凋亡峰。

    结论： Foxe3－shRNA可特异性抑制Foxe3基因的表达，并抑制晶状体上皮细胞生长和增殖。

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