白内障             2438                                      PO0050

　　Real time RT- PCR法检测Thapsigargin对HLE-B3细胞膜上Ca2+ - ATPase表达的影响

　　王晓黎 余秋蓉  吴文捷  李秀梅  张振平

　　中山大学附属第三医院 眼科 广州 510630

　　目的：探讨内质网Ca2+－ATPase选择性抑制剂Thapsigargin（TG）对HLE-B3细胞膜上Ca2+ATPase同工异构体PMCA1表达的调控。

　　方法：培养的HLE-B3细胞达到90％融合后，用浓度为0μM、0.01μM、0.1M、1μM和10μM的Thapsigargin分别处理4、12、16、24小时，然后分别抽取总mRNA,用real time RT-PCR的方法对细胞膜上Ca2+ATPase同工异构体PMCA1表达的进行定量检测。

　　结果：HLE-B3细胞0μM、0.01μM、0.1M、1μM和10μM的处理4、12、16、24小时后，发现在TG低浓度时（0μM、0.01μM、0.1M），随着TG浓度的升高，PMCA1mRNA的表达随之升高；而当TG浓度过高时（大于1μM），PMCA1mRNA的表达反而下降。

　　结论：在TG低浓度时，随着TG浓度的升高，Ca2+浓度升高，PMCA1mRNA的表达随之升高；而当TG浓度过高时，可能由于TG的毒性作用，PMCA1mRNA的表达反而下降。TG对PMCA1的调控作用主要在于它能升高胞浆的Ca2＋浓度，有关研究有望对后发障防治提供新的途径。

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