白内障             2709                                      PO0056

    蛋白酶体亚单位PSMB5基因真核表达载体的构建及其在人晶状体上皮细胞中的表达

   张铁英  刘奕志 吴明星  柳夏林

    广州中山大学中山眼科中心 510060

    目的 构建蛋白酶体亚单位PSMB5基因真核表达质粒，为进一步探讨年龄相关性白内障的发病机制及防治方法提供基础。

    方法 ：从人晶状体上皮细胞株SRA01/04中提取总RNA，经RT-PCR扩增获得PSMB5的全长cDNA片段，将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1上。将重组载体转染人晶状体上皮细胞并形成稳定表达，RT-PCR检测基因的表达，western blot检测蛋白的表达。

    结果 ：RT-PCR法扩增出约800bp的PSMB5基因全部编码序列的片段。酶切鉴定和测序分析证实所插入的PSMB5的基因序列完全正确。半定量RT-PCR法证实在转染的人晶体上皮细胞内有外源基因强表达，western blot检测证实PSMB5蛋白表达显著增加。 结论：成功的构建了蛋白酶体β5亚单位（PSMB5）基因真核表达重组质粒并转染真核细胞，为进一步研究蛋白酶体对晶状体上皮细胞的作用提供基础。

    结论：后段开放损伤眼PVR发生，RD存在和伤后14天以后实施玻璃体手术是伤眼解剖予后的危险因素。手术时机和RD与PVR发生率密切相关。RD存在促进PVR发生。RD合并PVR使予后更差。正确选择手术时机对改善伤眼予后有重要意义。

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