4  羊膜的制备和保存
    
　　从剖宫产或顺产无菌接生获得胎盘，供体(产妇)产前血清学检查，排除含有人类免疫缺陷性疾病(HIV)、乙肝病毒(HBV)和梅毒者；且产妇(供体)产道淋球菌、衣原体阴性。取出胎盘后即行灭菌处理。Prabhasawat［7］报道在层流罩下用50μg/ml青霉素、50μg/ml链霉素、100μg/ml新霉素、2.5μg/ml两性霉素B的Earle平衡盐溶液冲洗胎盘并获取羊膜。将羊膜平铺于硝酸纤维滤纸上并剪成3cm×4cm大小，储藏于-80℃含有Dulbecco改良的Eagle基质和甘油的无菌瓶中备用。Shimazaki［5］等报道，将羊膜与绒毛膜一起用含有地贝卡星(dibekacin)的PSS液处理后，于-80℃下保存。手术时解冻将羊膜与绒毛膜分离备用。我国陈家祺［8］提出湿房保存法，将新鲜羊膜制备后平铺于有盖的容器内，浸泡于DMEM培养液中，密封置于4℃冰箱保存12h内待用，此法用于新鲜羊膜移植。

　　5  手术应用范围
    
　　羊膜可用于多种眼表疾患的重建手术中［9］。①各种原因导致的角膜上皮缺损或溃疡包括外源性原因：感染、眼干燥症、眼表面化学烧伤及眼外伤等。内源性原因如神经营养因素神经麻痹、角膜软化等药物治疗无效时，用羊膜移植有明显的优越性或较好的疗效。对于角膜深层溃疡羊膜移植可用一层或多层覆盖溃疡表面治疗取得良好效果。②翼状胬肉切除术后常采用羊膜移植。毛羽翔等［10］报道应用羊膜移植治疗复发性翼状胬肉手术治愈率达到100％。③角膜缘干细胞缺乏伴有持续性角膜上皮缺损、角膜血管翳、白斑、溃疡溶解或穿孔等病例，角膜缘移植可以从根本上重建眼表。羊膜移植与角膜缘移植相结合，可以成功治疗角膜缘干细胞缺乏的眼表疾病，包括Stevens-Johnson综合征、眼瘢痕类天疱疮及眼部化学伤和热烧伤的病例。可先行角膜移植再行羊膜移植伴角膜缘移植。自体角膜缘植片可以培植于羊膜上用于眼表重建。④钟一声等［11］报道了羊膜在新西兰兔抗青光眼滤过性手术中的应用，刘永民等［12］报道了在青光眼兔模型羊膜移植治疗难治性青光眼方面的应用。⑤羊膜可治疗PRK术后角膜Hase的形成［13］。⑥羊膜用于热烧伤、化学烧伤引起的眼表疾病，尤其是双眼结膜大片瘢痕、睑球粘连以及穹窿部缩窄分离松解后等创面的修复术，羊膜能提供一个含基底膜和基质成分的胶原支架，以使受体及结膜或角膜表型的上皮细胞扩展移行于其上达到真正的结膜及角膜眼表的重建。
    
　　另外，羊膜尚可用于构建人工角膜［14］、药物缓释系统［15］、泪囊鼻腔造口术［16］。

　　6  手术方法及术后处理
    
　　羊膜的术前选择：新鲜羊膜及保存羊膜结构的完整性对羊膜移植的疗效均有显著影响。术前的羊膜常规病理检查能为术者选择优质羊膜提供客观依据，从而提高羊膜移植的疗效［17］。羊膜移植重建眼表的显微手术要点：①彻底清除病变组织：急性炎症期的眼表面坏死组织应该清除干净;瘢痕期的病例，术中应充分分离睑球粘连，切除增殖的瘢痕组织，恢复眼球的运动功能。否则会影响术后羊膜植片的存活甚至发生溶解;②创面的烧灼止血：急性期眼表清创或瘢痕期眼表彻底松解后创面的活动性出血点必须充分止血，否则可引起羊膜植片下积血，导致移植片延迟愈合甚至溶解、坏死;③羊膜植片的缝合固定：羊膜与周边结膜及移植床组织裸露创面的仔细、充分地缝合固定至关重要，它不仅有利于羊膜植片的贴附和生长，还有利于受体正常表型的眼表上皮细胞增殖、移行于羊膜植片之上。此外术中应确保穹窿部形成良好，必要时可考虑作2对穹窿部的临时提吊缝线，于眉毛下缘的皮肤穿出并用小硅胶片在皮肤面结扎，2周后拆除［8］。
    
　　术后常规绷带加压包扎，尽早敞开滴眼，对泪液功能分泌缺乏者，可频繁滴用人工泪液，联合角膜缘移植或板层角膜移植术者加用糖皮质激素眼液和1%的环孢素Ａ油剂滴眼。

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