基础 3438 PO0172
内皮细胞白细胞黏附分子-1(ELAM-1)对猪眼小梁细胞表达MMP-3及TIMP-1的影响 侯欣怡,周崎,赵家良
北京协和医院眼科 100730
目的 通过研究ELAM-1与抗体结合后对小梁细胞表达MMP-3及TIMP-1的影响,进一步了解ELAM-1在青光眼发病机制中的作用。
方法 将原代培养的猪小梁细胞血清饥饿培养16小时,分为六组:I)对照组,不加入任何药物;II)IL-1α组,加入IL-1α刺激;III)ELAM-1Ab组,用IL- 1α刺激后,再加入ELAM-1Ab;IV) ELAM-1Ab同时加入组,同时加入IL-1α和ELAM-1Ab;V)IgG组,用IL-1α刺激后,加入ELAM-1Ab,再加入IgG交联;VI)IgG同时加入组,同时加入IL-1α、ELAM-1Ab和IgG。对以上六组在相同作用条件下作用后,分别用免疫组化法、ELISA法和RT-PCR法检测小梁细胞MMP-3及TIMP-1的表达,同时用免疫组化法检测ELAM-1的表达。 结果 在原代培养的猪小梁细胞中,免疫组化和ELISA法显示第I组TIMP-1表达为阴性,其余五组TIMP-1表达均为阳性;RT-PCR显示以上六组TIMP-1表达均为阳性。免疫组化法显示II、III、V组的MMP-3表达为阳性,而RT-PCR显示只有II组的MMP-3表达为阳性,其余几组MMP-3表达均为阴性。另外,免疫组化法显示II组的ELAM-1表达为阳性,其余几组ELAM-1表达均为阴性。
结论 外源性IL-1α能刺激猪小梁细胞表达ELAM-1、MMP-3和TIMP-1,ELAM-1与抗体结合或进一步与IgG交联后可以抑制MMP-3的表达,但不影响TIMP-1的表达,使得MMP/TIMP平衡被破坏。
基于以上实验结果,我们推测ELAM-1与抗体结合后破坏MMP/TIMP平衡可能在青光眼的发病机制中具有重要作用。
声明:本站独家报道,转载须标明来源“中华眼科在线” |