角膜结膜及泪器病             2877                                      PO0354

　　表皮生长因子对兔角膜上皮细胞增殖及细胞周期相关蛋白作用的实验研究

　　王又冬  张劲松

　　沈阳 中国医科大学附属第四医院眼科 110005

　　目的　探讨表皮生长因子(EGF)对兔角膜上皮细胞的增殖刺激作用及其与细胞周期相关蛋白表达的关系。

　　方法　原代培养的兔角膜上皮细胞,通过WST-1细胞增殖实验,检测不同浓度和不同作用时间下EGF对细胞增殖的影响；采用Westernblot，检测10ng/mlEGF作用0、24、48、72小时后细胞周期相关蛋白CyclinD1、CDK4、p27、p21和p18的表达状况。

　　结果　比较不同浓度的EGF对兔角膜上皮细胞的增殖影响效果，10ng/ml的EGF对兔角膜上皮细胞的增殖促进作用最强。相同浓度EGF对兔角膜上皮细胞的增殖促进作用具有明显的时间依赖性，实验组与对照组差异有统计学意义。10ng/ml EGF作用0-72小时，CyclinD1和CDK4表达水平逐渐升高，而p27表达水平逐渐下降，p21和p18的表达则无变化。

　　结论　EGF对兔角膜上皮细胞具有明显的促增殖作用，其作用机制可能与其上调CyclinD1和CDK4以及抑制p27的表达密切相关。

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