治疗性的角膜移植针对的是有病变的角膜，不象LASIK术的角膜那样透明，都有不同程度的混浊，且切割的厚度与LASIK术切割的厚度不一样。但研究结果显示飞秒激光在浑浊的角膜上制作的角膜板层切面同样光滑，角膜透明度高，周围组织损伤小，术后内皮细胞存活影响小［15］。Sarayba等［16］的研究说明即使增加深度的调整，飞秒激光对于板层角膜移植的切割都能提供准确的深度和直径。
上述实验者均是在体外证实了飞秒激光的作用，Mian等［14］成功的在兔子体内也实行了完美的环钻和板层切割。术后随访17.9±6.5wk，观察后角膜片伤口的附着、角膜的透明度、屈光的稳定性、裂隙灯检查、中央及周边超声测量、角膜地形图。兔子眼伤口的愈合未出现明显交界面的雾状混浊及不规则散光。尽管有3只眼睛发生了角膜扩张，但这可能与兔眼角膜较薄且缺乏前弹力层有关。我们认为飞秒激光辅助DLEK相对安全与简便，但是需要进一步确定残留的前板层角膜厚度以防止角膜扩张。我们认为在体内实验阶段还需选择与人类角膜结构相似的灵长类动物进行实验。
飞秒激光辅助DLEK除体外及体内实验外，第1例临床实验由Cheng等［17］成功完成。Cheng 医生利用飞秒激光辅助DLEK治疗假晶状体大疱性角膜病。术后1wk深板层内皮完全贴附在受体角膜上，术后4mo深板层角膜透明且角膜散光为2.1D，证明移植的角膜内皮层具有功能。说明对于内皮功能紊乱的角膜进行DLEK，飞秒激光提供了一种造成侵害最小的新的外科途径。
4飞秒激光面临的挑战和应用前景的展望
虽然飞秒激光辅助DLEK有个别成功应用于临床的报道［17］，但总的来说 还处于体外实验及动物实验阶段。目前仍有大量问题待解决：（1）研究飞秒激光切割的能量，大小，方式等，以确保水肿的角膜深基质面更平滑，从而提高术后视力［13］ ；（2）需要更多临床应用的数据［15］；（3）需要大样本研究粘弹剂的统计学差别，确定对内皮最有保护作用的粘弹剂［20］；（4）进一步研究小切口隧道移植中折叠角膜板层片对术后内皮细胞存活率的影响；（5）进一步确定残留的前板层角膜厚度以防止角膜扩张等［14］。
Suwanapichon等［21］利用眼库保存眼，用微型角膜刀与飞秒激光在前、后角膜板层移植中对移植物进行预切割，但结果显示经过2d保存，内皮细胞的丢失与预处理关系并不明显。飞秒激光并没有体现明显的准确性和可重复性，所以它应用于眼库保存眼仍存在问题。飞秒激光制作角膜瓣需时较长、设备价格昂贵、占用空间大、维修费用高于微型角膜刀，在我国仅有一些大型医院拥有该设备，普及该技术仍有一定经济约束。
虽然飞秒激光辅助DLEK还存在以上待研究的问题，且在国内得以推广，取决于其成本的降低，但是它的优势突出，它能够在移植手术前很好的控制供体角膜瓣，能够避免手工剥离制备深板层内皮的技术困难。它术后评价高，并以全自动化的特点、标准化的制作程序，在DLEK术中呈现出巨大的潜力，给眼科医生带来了一个全新的方案。我们相信飞秒激光辅助DLEK是角膜疾病外科治疗的一种有前途的新方法。
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