闫东升 周翔天 胡诞宁 陈晓燕 王教 吕帆 屠理理 瞿佳
温州医学院眼视光学院325003
目的：MicroRNAs (miRNAs) 是内源性表达长度为20-24个核苷酸的RNA分子，通过结合到靶mRNA上而抑制基因的表达。最近的研究表明某些miRNAs可以调节肿瘤细胞的增殖与迁移。miRNA在葡萄膜黑色素瘤中的作用仍然是未知的。本研究旨在研究miR-34a在葡萄膜黑色素瘤中的功能。
方法：我们通过Northern印迹杂交来检测miR-34a在葡萄膜黑色素瘤与黑色素细胞中的表达。通过生物信息学预测miR-34a作用的靶基因。通过基因转染将miR-34a转入葡萄膜黑色素瘤细胞。通过蛋白印迹检测miR-34a对c-met蛋白的作用。MTT法检测葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖。Transwell实验评估葡萄膜黑色素瘤细胞的迁移。
结果： miR-34a在黑色素细胞中表达，但在葡萄膜黑色素瘤细胞中不表达。信息分析表明c-met 基因的3’非翻译区有两个miR-34a的结合位点。将此区域插入荧光素酶基因的3’非翻译区，然后将报告基因载体与miR-34a共转染HEK 293细胞，荧光素酶的活性受到抑制。蛋白印迹分析表明miR-34a使c-met的表达降低。将miR-34a转染葡萄膜黑色素瘤细胞后能够明显抑制细胞的增殖与迁移。
结论： 我们的研究结果证明miR-34a通过作用于c-met而抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖与迁移。说明miR-34a可作为葡萄膜黑色素瘤抑制因子而起作用。
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