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FK-506抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究

http://www.cnophol.com 2009-8-20 9:45:46 中华眼科在线

  FK-506抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究

  中华眼科杂志 1999年第1期第35卷 眼表疾病

  作者:吕岚 张文华 孙旭光

  单位:吕岚(100730 首都医科大学附属北京同仁医院眼科);张文华 孙旭光(北京市眼科研究所)

  关键词:大鼠;角膜移植;穿透性;移植物抗宿主反应;FK-506

  【摘要】 目的 建立近交系大鼠穿透性角膜移植动物模型,观察结膜下注射FK-506对角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法 将近交系Lou大鼠28只作受体,14只F344大鼠作供体,分为3组,术后结膜下分别按每公斤体重注射0.1 mg FK-506、3 mg CsA及生理盐水,共2周。对角膜植片进行临床观察,以混浊、水肿和新生血管3项指标作为临床评估标准。结果 3组角膜植片的存活时间分别为(22.1±5.17)、(18.4±1.4)及(12.1±2.13)天,三者间差异有显著性(P<0.01)。结论 FK-506能显著延长大鼠角膜植片的存活时间,是一种有效的新型免疫抑制剂。

  Experimental studies on the effect of the immunosuppressant FK-506

  on penetrating keratoplasty rejection model in rats

L Lan*, ZHANG Wenhua, SUN Xuguang.

  *Department of Ophthalmology, Affiliated Tong Ren Hospital,

  Capital Medical University, Beijing 100730

  【Abstract】 Objective To study the immunosuppressive effects of FK-506 on allogeneic transplantation in a rat model.Methods Inbred strain Lou rats were used as recipients, and F344 rats were used as donors. Subconjunctival injection of FK-506 0.1 mg/kg and cyclosporine A (CsA) 3 mg/kg were administered respectively for 2 weeks, and the grafts were inspected by clinical evaluation.Results The group receiving FK-506 had a significant delay in allograft rejection with mean survival time (22.1±5.17) days vs. (18.4±1.4) days for the CsA group and (12.1±2.13) days for the control group (P<0.01).Conclusion It is indicated that FK-506 would be a useful drug to suppress corneal graft rejection.

  【Key words】 Rats  Keratoplasty, penetrating  Graft vs host reaction  FK-506

  免疫排斥反应是导致角膜移植手术失败的首要原因[1],应用免疫抑制剂是其主要的治疗方法,皮质类固醇是较常用的药物[2],但其治疗效果却不尽如人意,对于高危患者,激素治疗常常无效。近年来应用环胞霉素A(cyclosporine A,CsA)使角膜移植的预后有所改观,但排斥反应仍有发生[3]。因此,新型高效免疫抑制剂的研究具有重要意义。

  FK-506是一种新型免疫抑制剂,其免疫抑制作用强于CsA[4,5]。我们应用大鼠建立穿透性角膜移植(penetrating keratoplasty,PKP)动物模型,研究FK-506对角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。

  材料和方法

  一、实验动物

  选用近交系大鼠(Lou,RT1U)28只作受体,与其主要组织相容性系统完全不同的另一近交系大鼠(F344,RT1V)14只作供体。供、受体均为雌性,体重150~200 g,年龄2~3个月。受体动物右眼接受角膜移植,供体双眼取材后处死。实验动物购自中国医学科学院动物研究所。

  二、手术方法

  参照Williams等[6]方法,术前15分钟以1%阿托品滴眼液和美多丽-P(0.5%托品酰胺,0.5%盐酸新福林)散瞳,腹腔内注射2.5%硫贲妥钠10~15 mg/kg麻醉。手术在显微镜下进行。首先于供体角膜钻取直径3.5 mm植片,于受体右眼行PKP,用直径3.0 mm环钻钻除中央区角膜,将植片置于植床,以10-0尼龙线间断缝合8针,线结不埋藏。术毕散瞳,结膜下注射庆大霉素2 000 U,睑缘缝合。

  三、药品

  FK-506结晶系日本Fujisawa医药公司惠赠,使用前溶入生理盐水中制成混悬液。CsA系瑞士Sandoz药厂产品,使用前用生理盐水稀释。

  四、治疗方案

  FK-506组10只大鼠,自手术当天开始连续右眼结膜下注射0.1 mg/kg FK-506,共2周;CsA组8只大鼠作为阳性对照,结膜下注射3 mg/kg CsA,用法同前;阴性对照组10只大鼠,结膜下注射生理盐水。所有动物术后均连续结膜下注射庆大霉素2天,0.25%氯霉素及美多丽-P滴眼,每天1次,共1周。

  五、临床观察

  自术后第1天开始,Lou大鼠每天经乙醚麻醉后在裂隙灯下观察直至排斥反应发生。以后每周观察2或3次,连续观察2~4周。同时观察其角膜植片,并对角膜混浊、水肿及新生血管3项指标进行评分,评分参照Holland等[7]方法,3项评分之和为当日排斥反应指数(rejection index,RI),当RI≥6时,视为排斥反应发生。术后有严重前房出血、虹膜广泛前粘连、伤口裂开及植片感染的大鼠均在本研究之外。

  六、实验结果的统计学方法

  本文数据采用计算机Systat统计软件进行方差分析,对方差不齐者先用以10为底的对数进行转换后再行方差分析。

  结果

  一、植片存活时间

  FK-506、CsA和对照组大鼠角膜植片存活时间分别为(22.1±5.17)、(18.4±1.41)和(12.1±2.13)天。统计结果表明,FK-506和CsA均能明显延长角膜植片的存活时间,与对照组相比差异有显著性(P<0.01),且FK-506的作用优于CsA(P<0.01)。

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(来源:互联网)(责编:xhhdm)

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