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雷公藤多甙治疗抗原诱导性葡萄膜视网膜炎的临床及实验研究

http://www.cnophol.com 2009-8-21 10:02:24 中华眼科在线

  2 结果

  2.1 临床观察 雷公藤口服组及对照组的临床分级和炎症持续时间见表1~2。

  表1 雷公藤多甙治疗AIU第1、3、5天临床分级

  Table 1 Clinical evaluation of AIU treated

  with TⅡ on the first,third and fifth day

  *The first day after S antigen was injected into vitreous cavity,compared with control group  玻璃体腔S抗原注射术后第1天 aP<0.05,bP<0.05,与对照组比较aP>0.05,bP<0.05

  表2 雷公藤多甙治疗AIU临床表现持续时间

  Table 2 Clinical duration of AIU treated with TⅡ

  Compared with control group,aP<0.01,与对照组比较aP<0.01

  2.2 组织学观察 对照组有全葡萄膜炎的病理改变,主要表现有前房和玻璃体腔大量炎性细胞渗出,虹膜、睫状体和脉络膜视网膜增厚并有炎性细胞浸润。雷公藤口服组前房和玻璃体腔炎性细胞渗出较少,葡萄膜和视网膜炎性细胞轻度浸润。

  2.3 血清抗体滴度测定 5只实验组大鼠血清抗体滴度平均为1∶4,5只对照组大鼠平均为1∶8~1∶16,实验组与对照组比较,S抗原和稀释血清之间的反应带稍弱(图1)。

  Figure 1 Shows immunodiffusion plate reaction of serum in AIU rats(periphery)with S antigen of bovine(center).Serum antibody titers of control were 1∶16(left),and serum antibody titers of TⅡfed were 1∶4(right) AIU大鼠血清(外围孔)和牛S抗原(中央孔)双向免疫扩散的反应带,左侧为对照组,抗血清滴度1∶16,右侧为实验组,抗血清滴度1∶4

  2.4 淋巴细胞增殖反应测定 倒置显微镜下观察培养细胞的生长情况,发现雷公藤口服组与对照组比较,加入S抗原刺激剂后发生增殖的淋巴细胞数较少,形成克隆的细胞簇也较少。MTT测定的OD值均有下降(与对照组比较P<0.01),见表3。

  表3 MTT比色分析法测定淋巴细胞转化*

  Table 3 Lymphocyte proliferation assay assessed by MTT

  colorimetric determination(OD)(1×106 spleen cells/well)

  Compared with control group,aP<0.01,与对照组比较aP<0.01

  3 讨论

  本实验发现,与口服BSA对照组比较,TⅡ治疗组临床观察术后第3天和第5天的临床分级显著性下降,葡萄膜炎持续时间显著缩短。TⅡ治疗组的组织学检查发现炎性反应较对照组减弱。用半定量的双向免疫扩散法测定血清抗体滴度,发现对照组平均为1∶8~1∶16,雷公藤多甙治疗组平均为1∶4,且治疗组S抗原和稀释血清之间的反应带较对照组弱,提示雷公藤具有抑制AIU体液免疫的作用。治疗组和对照组的淋巴细胞抗原特异性增殖反应以及DTH反应发生了显著性下降,提示雷公藤具有抑制AIU细胞免疫反应的能力。

  雷公藤可在多个环节发挥免疫抑制作用。雷公藤多甙可直接抑制B细胞对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的增殖反应和抗体产生,抑制ConA诱导的T细胞增殖反应,抑制Th细胞IL-2的产生和IL-2受体的表达,抑制细胞毒T细胞反应,并通过激活抑制性T细胞(Ts)发挥免疫调节作用[8,9]。实验也发现,雷公藤有促进肾上腺合成皮质激素以及增强肾上腺皮质功能的作用,可减轻水肿和炎性细胞浸润,降低血浆PGE2含量和抑制肉芽增生[1]。

  雷公藤生药是毒性较大的中药,其毒性作用包括对肝、肾、胃肠道、呼吸系统、神经系统等损害[1,3]。TⅡ的毒性相对较弱,在本实验条件下,30mg·kg-1.d-1每日2次给药,连续用药14d,未见对大鼠组织器官有明显损害,提示TⅡ在一定时间内连续用药对大鼠的毒性不大。

  根据本文的实验以及有关文献,作者认为用雷公藤治疗葡萄膜炎和其它自身免疫性疾病仍有许多发展空间。例如:(1)雷公藤与其它免疫抑制剂联合用药可以增强疗效,减少毒性反应;(2)进一步从TⅡ中分离提纯出高效低毒的雷公藤单体成分[10],将更有利于临床应用;(3)用雷公藤缓释片、微囊和糖浆等载药方式,发挥其减少不良反应和服用安全方便等特点。

  基金项目:国家自然科学基金(序号39500158)、霍英东教育基金会和广东省自然科学基金(序号 960208)部分资助

  作者简介:陈建苏,女,出生于1961年1月,长沙人,汉族,中共党员。1983年毕业于广州中山医科大学,获医学学士;1985~1988年就读于广州暨南大学,获医学硕士;1994~ 1998年就读于广州暨南大学,获医学博士。职称:副研究员。获奖情况:1991年7月获国家教育委员会科学技术进步一等奖(异种角膜移植的研究);1997年3月获国家教

  育委员会科学技术进步二等奖(异种表面角膜镜的研究)。

  联系电话:020-85212943
  (H);传真:020-85213245。

  参考文献:

  [1]曹 敏,孙荣奇,吴达俊,等.中药雷公藤的研究进展[J].中成药1996;18(4)∶40-42.

  [2]周朝晖,何守志,梁延杰,等.雷公藤多甙对兔眼人工晶体植入术后虹膜睫状体炎症反应的影响[J].中华眼底病杂志 1997;13(4)∶245.

  [3]李志杰,李 辰.雷公藤多甙防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究[J].眼科研究 1996;14(2)∶76-78.

  [4]吴 京,周国筠,傅 瑞,等.雷公藤多甙对异位角膜移植抗排斥反应的研究[J].眼科新进展 1998;18(2)∶63-65.

  [5]陈建苏,李志杰,李 辰.快速高效分离纯化牛视网膜S抗原[J].眼科研究 1998;16(2)∶97-98.

  [6]Wacker WB,Barbee JY,MacDonald RJ.Experimental allergic uveitis III manifestations produced in the guinea pig by immunization with homologous retina[J].Invest Ophthalmol 1969;8∶381-392.

  [7]Mosmann T.Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival:application to proliferation and cytoxicity assays[J].J Immunol Methods 1983;65∶55-64.

  [8]朱立平,董彦章,蒋 明,等.雷公藤多甙在细胞周期多个阶段抑制T细胞增殖[J].中国免疫学杂志 1992;8(6)∶379-382.

  [9]左冬梅,张绍伦.雷公藤对T、B细胞功能的不同影响[J].中国免疫学杂志 1986;2(4)∶232-235.

  [10]范勇毅,崔光辉,管远志.雷公藤单体T4体外给药对IL-2R表达的影响[J].中国免疫学杂志 1996;12(3)∶171-173.

  收稿日期:1998-10-06

  修稿日期:1998-12-28

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(来源:互联网)(责编:xhhdm)

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