2　结果

　　2．1　PRK后角膜伤口愈合情况

　　PRK后5～7天角膜上皮层完全修复；术后1月，可见1～2级haze形成；2月时haze形成最明显，可达2～3级，未见到4级haze形成；术后3月，形成的haze明显减轻，仅见0.5～1级haze。

　　2．2　兔角膜PRK后PDGF　mRNA的表达

　　正常和PRK后1，2，3月兔角膜行PDGF原位杂交，观察其mRNA表达，以上皮细胞浆和基质中有无蓝紫色杂交颗粒区分阳性和阴性表达，以颗粒着染浓密程度区分表达强弱。正常兔角膜上皮细胞有PDGF　mRNA表达，而基质中无表达(图1)。PRK后1月，角膜上皮细胞PDGF　mRNA表达较正常角膜上皮细胞表达增强，而基质中无PDGF　mRNA表达；PRK后2月，上皮细胞层可见PDGF　mRNA呈浓密表达，且基质中亦有轻微表达(图2)；PRK后3月，上皮细胞PDGF　mRNA表达较前期减弱，但仍较正常上皮细胞表达增强，基质中未见明显PDGF表达。PRK后角膜上皮细胞PDGF　mRNA的表达强弱与形成haze的轻重有密切关系，2月时haze形成最明显，角膜上皮细胞PDGF　mRNA表达亦最明显。 

　　图1　正常角膜上皮细胞层有PDGF　mRNA表达，基质中无表达（×400）　图2　PRK后2月，上皮细胞层PDGF　mRNA呈浓密表达，且基质中亦有轻微表达（×400）　Fig．1　PDGF　mRNA　expression　was

　　exclusively　present　in　the　normal　corneal　epithelium（×400）　Fig．2　PDGF　mRNA　was　predominantly　expressed　by　corneal

　　epithelium　and　slightly　expressed　by　corneal　stroma　at　the　2nd　month　after　PRK（×400）

　　3　讨论

　　3．1　PDGF的特性及作用

　　PDGF是一肽类生长因子，最先从血小板中分离得到而命名，尔后发现平滑肌细胞、血管内皮细胞、激活的巨噬细胞及肿瘤细胞等均能合成和分泌PDGF。它由A，B两链通过二硫键结合而成的同源二聚体或异源二聚体构成，相对分子质量约30 000［4］。A，B两链最初合成时是无活性的前体，再通过蛋白降解成含100多个氨基酸的成熟多肽链。在成熟的A，B链中大约有60%的氨基酸系列是相似的，并且每一链中均含有8个半胱氨酸残基。

　　PDGF是结缔组织细胞和胶质细胞的主要分裂源，它能促进机体伤口愈合和胚胎发育，同时也能导致机体内一些不良反应，如产生纤维化性病灶、动脉粥样硬化和促进肿瘤生长等。在伤口愈合过程中，PDGF能促进细胞外基质(extracellular　matrix，ECM)产生和炎性细胞的趋化。在中枢神经系统发育过程中，PDGF能通过旁分泌或自分泌机制调节神经细胞的生长和分化［5］。

　　3．2　PRK后角膜表达PDGF　mRNA的变化和意义

　　PRK后伤口愈合过程包括：上皮和基质细胞的移行，细胞的有丝分裂和分化及ECM的再生等。目前研究认为PRK后发生的haze是由激活的角膜基质细胞分泌过多的异常胶原纤维所造成的［1］。临床研究表明，haze形成高峰期在术后2个月左右，术后6个月左右可以减轻或消失［6］。本实验观察发现兔眼PRK后1月已有haze形成，2月时haze形成最明显，可达3级，3月左右形成的haze开始减轻或消退，这与临床观察结果基本一致。
 
　　正常角膜上皮－基质间存在着相互作用，Li等［7］研究发现角膜上皮细胞有PDGF　mRNA表达，而角膜基质细胞有PDGF受体β mRNA表达，PDGF通过PDGF-PDGF受体β轴调节着角膜上皮－基质的相互作用。本实验结果发现正常兔角膜上皮细胞层有PDGF　mRNA表达，而基质中无表达，这与Li等的研究结果基本一致。

　　PDGF参与PRK后伤口愈合过程，本实验发现PRK后角膜上皮细胞PDGF　mRNA表达明显增强，术后2月，角膜上皮细胞PDGF　mRNA表达最强，且基质中亦有轻微表达。haze形成明显时，角膜上皮细胞PDGF　mRNA表达亦明显，表明PDGF参与调节haze的形成和发展。当然，haze形成是一个非常复杂的过程，许多细胞因子或因素共同调节着haze的形成和发展。有关其它细胞因子或因素对PRK后伤口愈合的调节有待进一步研究。

　　1，钟一声，李翠萍．激光角膜光学切除术后伤口愈后的研究．中国激光医学杂志，1998，7∶170

　　2，Rai NS，Geiss Ⅲ MJ，Fantes F，et al．Healing of excimer laser ablated monkey corneas：an immunohistochemical evaluation．Arch Ophthalmol，1990，108∶1604

　　3，章有章，赵涵芳，程枫，等．大鼠深Ⅱ度烫伤后4种生长因子mRNA的表达．上海第二医科大学学报，1997，17（Suppl）：30

　　4，Hummacher A，Hellman U，Johnsson A，et al．A major part of PDGF purified from human platelets is a heterodimer of one A chain and one B chain．J Biol Chem，1988，263∶16493

　　5，Heldin CH，Westermark B．Platelet-derived growth factor．Mol Cell Biol，1985，3∶169

　　6，Gastry DS，Kerr Muir MG，Lohman CP，et al．The effect of topical corticosteroid on refractive outcome and corneal haze after photorefractive keratectomy．Arch Ophthalmol，1992，110∶944

　　7，Li DQ，Tseng SCG．Three patterns of cytokine expression potentially involved in epithelial-fibroblast interactions of human ocular surface．J Cell Physiol，1995，163∶61

　　(收稿：1999－04－10　修回：1999－11－08)

上一页  [1] [2]