潘士印   肖湘华   王养正   朱秀萍

陕西省眼科研究所   西安市第一医院   710002

目的：改进房水及血液样品处理方法，建立一种新的反相高效液相色谱法（RP-HPLC），用于测定眼房水及全血中的环孢素A（CsA）浓度。

方法：在乙腈-水流动相体系中，研究CsA测定的诸条件：样品的预处理，流动相的组成，柱温的选择等；提出RP-HPLC测定CsA的新方法：于ODS-C18柱（4.6×250mm，5μm），以乙腈-水（70∶30，v：v）为流动相，在60℃柱温下，于210nm处检测。对兔眼应用1%CsA眼膏1h后和大鼠灌胃50mgCsA溶液1h后，分别检测房水和全血中CsA的浓度。

结果：采用乙腈-水-正己烷-甲醇的处理方法，CsA的峰面积与其浓度具有很好的线性关系：y=339.2x+4505.2，R2=0.9991，CsA线性范围为62.6-626ng/ml，最低检测浓度50ng/ml，回收率98.7-100.21%，日内和日间变异系数小于6.0%。经HPLC检测，对兔应用1%CsA眼膏1h后，房水浓度在144-466ng/ml；大鼠灌胃1h后，CsA血液浓度在210-600ng/ml。

结论：采用乙腈-水-正己烷-甲醇的处理方法，能更有效的除去房水及全血中的杂质，减少对CsA测定的干扰。该HPLC检测方法简单、准确、经济，可用于CsA的房水及血药浓度检测。