刘琼 于健 曾骏文
南方医科大学南方医院眼科 中山大学中山眼科中心 510515
目的:探讨M受体五种亚型在正常幼龄豚鼠眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜-睫状体组织中分布及其mRNA表达。
方法:冰冻切片,免疫荧光观察M受体五种亚型在正常豚鼠眼组织的分布。提取正常豚鼠视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜-睫状体组织总RNA,RT-PCR检测M受体五种亚型mRNA的表达。
结果:1.正常豚鼠眼免疫荧光共聚焦显微镜照相显示:抗M1~M5亚型的抗体的染色均为绿色阳性荧光。视网膜组织中,M1亚型主要分布在光感受器和外丛状层;M2亚型主要见于外核层和光感受器细胞层,内核层染色呈弱阳性;M3亚型弥漫分布于内、外丛状层和光感受器细胞层;而M4亚型在光感受器、内、外丛状层及节细胞层的染色均为强阳性,内核层的染色呈弱阳性;M5亚型在内、外核层和光感受器细胞层染色呈弱阳性。脉络膜组织中,脉络膜的基质中和血管壁上均可见M1~M5受体亚型的染色呈绿色荧光,其中以M3亚型染色呈强阳性。巩膜基质中可见到M1~M5亚型的绿色荧光,围绕在成纤维细胞梭型核周围。虹膜上皮层和基质中可见到M1~M5亚型散在的绿色荧光分布。2.M1~M5亚型经RT-PCR扩增后的产物的大小和预期的一致,分别为437、659、506、466和455bp。在上述四种组织均有M1~M5亚型的mRNA表达。M3亚型的mRNA表达在虹膜睫状体组织表达较高,巩膜组织与其他组织相比较,M3和M4亚型的mRNA表达量较低。
结论:M受体五种亚型广泛分布于豚鼠眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜-睫状体组织中。
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