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2结果
透射电镜示对照组视网膜光感受器细胞外节膜盘完整，排列整齐；RPE顶部大量较粗短的微绒毛包绕在外节膜盘周围；RPE基底部质膜内褶发达，胞质中含大量线粒体、吞饮小泡和滑面内质网。可见圆形或卵圆形色素颗粒；视网膜血管内皮细胞核膜完整连续，异染色质分布均匀；细胞连接清晰、规则（图1A）。tPVR组视杆细胞外节膜盘结构消失，代之以许多黑色粗大颗粒；RPE微绒毛与膜盘层脱离，RPE基底部质膜内褶明显减少，胞质中线粒体嵴脱失、部分线粒体呈空泡状，胞质中可见较多滑面内质网，未见吞饮小泡，细胞连接结构模糊不清；视网膜血管内皮细胞核异型明显，核膜不连续，异染色质边集，呈点线状不连续（图1B）。外伤后应用GM 6001组，视网膜光感受器细胞外节膜盘结构尚清晰，排列欠整齐，与RPE顶部微绒毛连接疏松；RPE基底部质膜内褶较tPVR组多，胞质中含大量线粒体、吞饮小泡和滑面内质网，部分线粒体嵴脱失。细胞连接清晰、规则（图1C）。
3讨论
tPVR是发生在眼球穿通伤后因创伤修复的过度瘢痕化所引起的牵引性视网膜脱离。该疾病是眼外伤，尤其是眼后节穿通伤后常见的棘手的严重并发症之一。目前此类疾病尚缺乏有效的预防措施，且临床疗效欠佳。tPVR发病机制目前尚未十分明确。目前，在国内外各种研究中，对tPVR病程中视网膜超微结构改变报道甚少。无论从何种发病机制来说，视网膜的变化在tPVR的发生发展中都起着不可忽略的重要作用。有研究证实，tPVR属于眼内发生的过度损伤修复反应，是一个以时相为特征的程序化过程：包括炎症期、增生期和瘢痕期[13]。炎症期主要为视网膜裂孔以及血视网膜屏障的破坏和活性介质释放，临床表现为玻璃体混浊，有蛋白条纹；增生期玻璃体内的尘状棕色颗粒表示视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelium，RPE）的释放，灰色细胞团则是增生的表现；细胞增生达到相当程度形成瘢痕，瘢痕增生膜的收缩会导致牵拉性视网膜脱离。各期的时相也可能存在重叠[4,5]。
我们在研究中发现，实验对照组大鼠视网膜光感受器细胞外节膜盘完整，排列整齐。RPE质膜连续，顶部大量细长的微绒毛伸入细胞间隙内，较粗短的微绒毛包绕在外节膜盘周围。基底部大量质膜内褶，其内侧胞浆中含有多量线粒体、吞饮小泡和滑面内质网。可见圆形或卵圆形色素颗粒。视网膜毛细血管由内皮细胞、周细胞和基底膜构成，内皮细胞位于管腔面，外侧有连续的基底膜和周细胞包绕。内皮细胞核内异染色质分布均匀，细胞器、细胞核形态正常。细胞连接清晰规则。而tPVR组大鼠视网膜层次完全改变。视杆细胞外节膜盘层变薄，甚至在视网膜的某些节段缺失、溶解；原本清晰的膜盘板层结构消失，代之以许多黑色粗大颗粒。RPE微绒毛与膜盘层脱离。RPE基底部质膜内褶明显减少，胞质中线粒体嵴脱失、部分线粒体呈空泡状。胞质中可见较多滑面内质网，未见吞饮小泡。细胞连接结构模糊不清。视网膜血管内皮细胞核异型明显，核膜不连续，异染色质边集，呈点线状不连续。
透射电镜下观察人眼tPVR的增生膜发现，增殖膜标本以长梭形成纤维细胞及大量胶原纤维为主要组成部分。一些成纤维细胞膜下可见沿细胞长轴平行排列的微丝束，细胞核大，一些细胞有明显皱褶。亦可见变性的RPE细胞：近梭形，表面有分支，胞浆内含大量黑色素颗粒；以及少量吞噬细胞：核大，形态不一，表面有短微绒毛，胞浆内可见次级溶酶体各种形态的退变产物、以及黑色素颗粒。少数病例可见新生血管，典型者含内皮细胞、周细胞和基底膜，有些管径较大。PVR的组织学检查可见它的细胞成分包括RPE、神经胶质细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、玻璃体细胞及一些炎性细胞[6]。PVR是由细胞及这些细胞产生的胶原纤维共同组成的。其中，成纤维细胞及RPE是主要细胞成分，巨噬细胞和炎性因子则是重要刺激因子。PVR的细胞间质主要由大量胶原纤维组成，这些胶原纤维是由增生膜中的细胞产生，直径20～50nm，比正常的玻璃体胶原纤维粗一倍，间质中还有一些白蛋白[7]。
我们在研究中发现GM 6001实验组，视网膜光感受器细胞外节膜盘结构尚清晰，排列欠整齐，与RPE顶部微绒毛连接疏松。RPE基底部质膜内褶较tPVR组多，胞质中含大量线粒体、吞饮小泡和滑面内质网，部分线粒体嵴脱失。细胞连接清晰、规则。GM 6001又名Galardon或Ilomastat，是一种羧氨酸修饰的二肽，其抑制力为巯基肽的10～15倍，是目前已知作用最强的合成的广谱基质金属蛋白酶抑制剂。已有研究表明，GM 6001可能通过在酶蛋白水平抑制MMPs的活性，降低视网膜组织MMPs的表达，减轻其对ECM的降解和破坏作用；以及抑制其他细胞因子的表达，抑制RPE等细胞运动与增殖，减轻炎症反应。并通过维持视网膜基底膜与ECM成分降解和合成的协调[7,8]。这在创伤后视网膜组织的修复重塑中可能存在重要意义：减弱基底膜与ECM基质的降解，促进新合成胶原的沉积，抑制炎性细胞浸润及其分泌的蛋白水解酶，从而维持细胞的静止状态，保护视网膜组织结构，干预tPVR形成[810]。本研究结果表明GM 6001对tPVR病程中的视网膜光感受器细胞、RPE、视网膜内外屏障所受到的损害，具有一定程度的保护作用。本研究为临床应用GM 6001干预tPVR的发生发展提供实验基础及理论依据。
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