叶青   何为民

四川大学华西医院眼科   610041

目的：探讨透明质酸酶对人眼眶成纤维细胞增殖以及分泌透明质酸的影响，为透明质酸酶用于甲状腺相关眼病患者的治疗提供实验依据。

方法：取得健康意外死亡者眼眶脂肪组织行眼眶成纤维细胞培养，观察形态和生物学特性。用不同浓度透明质酸酶（0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、500μg/ml）分别处理细胞，在不同时间点（24 h、48 h、72 h）观察细胞形态变化；MTT检测细胞增殖情况；ELISA检测透明质酸含量。

结果：体外成功培养人眼眶成纤维细胞；各浓度透明质酸酶作用眼眶成纤维细胞后细胞形态密度未见明显差别；MTT测得OD值在各时间点上的差异无统计学意义（F24h=1.135，F48h=0.193，F72h=0.521，P值均>0.05）；各浓度实验组分别与在同一时间点的正常对照组相比无显著差异（P>0.05）；各浓度透明质酸酶组均较对空白对照组透明质酸含量减少，随浓度升高透明质酸含量减低，随时间变化实验组与对照组透明质酸含量差值增加。各浓度组在三个时间点分解透明质酸量与空白对照组均具有显著性差异（P<0.01）。

结论：通过获取人眼眶脂肪结缔组织进行组织块法成功培养，传代获得纯化眼眶成纤维细胞；实验设定浓度范围的透明质酸酶对眼眶成纤维细胞的增殖无明显影响；眼眶成纤维细胞能分泌透明质酸，不同浓度透明质酸酶均对其有分解作用，且呈剂量和时间依赖性。