邬海翔 吕嘉华 刘卫 张勇 任慧 徐格致

　　上海五官科医院 200031

　　目的：探讨胰岛素、高糖对牛视网膜微血管内皮(BRE)细胞活性氧(reactive oxygen species，ROS)产生及细胞凋亡的影响。

　　方法：对照实验研究。采用选择性培养方法，培养BRE细胞，传代后分别在正常糖(5 mmol/L)或高糖(30 mmol/L)浓度下培养3d，甘露醇平衡渗透压，血清饥饿12 h，给予或不给予100 nmol/L胰岛素作用24 h。细胞活性氧的产生由H2DCFDA染色后流式胞仪检测，凋亡由Annexin V/FITC和碘化丙锭(PI)双染后流式胞仪检测。采用2×2析因设计定量资料方差分析及χ2检验，以P<0.05作为差异有统计学意义。

　　结果：胰岛素或高糖浓度可以显著增加BRE细胞线粒体活性氧的产生，且胰岛素联合高糖的作用较两者任一单独作用增强。高糖作用下BRE细胞凋亡增多，而胰岛素作用后BRE细胞凋亡减少，并且胰岛素可以减少高糖诱导的BRE细胞凋亡

　　结论：胰岛素作用高糖下BRE细胞可以产生大量ROS，这可能是胰岛素治疗导致糖尿病视网膜病变短暂恶化的因素之一，而这种恶化并不是通过BRE细胞凋亡的机制所引起。